Objetivo: Baseado em farmacologia de rede, acoplamento molecular e experimentos com animais, investigar o mecanismo pelo qual o Daxueteng alivia a dor neuropática (NP). Método: A composição química do Daxueteng foi identificada por cromatografia líquida ultrarrápida acoplada a espectrometria de massas de alta resolução UHPLC-Q-Orbitrap HRMS. A farmacologia de rede previu os principais alvos e vias relacionadas para a intervenção do Daxueteng na NP. 48 ratos SD foram aleatoriamente divididos em grupos de cirurgia simulada, modelo, grupos de baixa, média e alta dose de Daxueteng (1,35, 2,7, 5,4 g·kg^-1) e grupo pregabalina (30 mg·kg^-1). Foi preparado um modelo de lesão por compressão crônica (CCI) de NP, e o limiar do reflexo de retirada mecânica do pé (MWT) e o limiar do reflexo de retirada térmica do pé (TWL) foram medidos antes da cirurgia, nos dias 3 e 5 pós-cirurgia e nos dias 3, 7, 11 e 14 após intervenção medicamentosa em cada grupo de ratos. A imunofluorescência (IF) detectou a expressão do marcador de excitabilidade neuronal fos (c-Fos) e do receptor de neuroquinina 1 (NK-1R) necessário para sensibilização central. O western blot detectou a expressão e o nível de fosforilação em tecido da medula espinhal das proteínas fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), receptor tirosina quinase B (TrkB), fosfolipase Cγ (PLCγ), quinase dependente de cálcio/calmodulina IIα (CaMKⅡα), proteína de ligação ao elemento de resposta cAMP (CREB). IF detectou a expressão fosforilada (p)-TrkB, p-PLCγ, p-CaMKⅡα, p-CREB na medula espinhal. Resultados: O Daxueteng contém 138 compostos; a farmacologia de rede identificou 409 potenciais alvos de intervenção na NP, incluindo 74 alvos centrais, como receptor tirosina quinase neurotrófica 2 (NTRK2), ciclooxigenase 2 (PTGS2), alvo da rapamicina (mTOR), proteína quinase 1 (Akt1), quinase ativada por mitógeno 1 (MAPK1). O acoplamento molecular mostrou boa afinidade de ligação do NTRK2 (gene que codifica a proteína TrkB) com rodiolosídeo, swertiamarin, genisteína, quercetina, naringina e curcumina. Os resultados comportamentais em animais mostraram que, em comparação com o grupo cirurgia simulada, o grupo modelo teve reduções significativas nos limiares MWT e TWL (P<0.01). O IF mostrou aumento significativo na expressão de c-Fos e NK-1R na medula espinhal do grupo modelo em comparação ao grupo cirurgia simulada (P<0.01); redução significativa na expressão na dose alta de Daxueteng em comparação ao grupo modelo (P<0.01). Western blot e IF revelaram aumentos significativos na expressão de BDNF, TrkB, p-TrkB, PLCγ, p-PLCγ, CaMKⅡα, p-CaMKⅡα, CREB e p-CREB no grupo modelo em comparação ao simulado (P<0.01); reduções significativas na dose alta em comparação ao modelo (P<0.01). Conclusão: Daxueteng alivia a dor neuropática suprimindo a excitabilidade neuronal e a sensibilização central através da via de sinalização BDNF/TrkB/CaMKⅡ/CREB.

Daxueteng; dor neuropática; excitabilidade neuronal; sensibilização central; fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF)/ receptor tirosina quinase B (TrkB)/ quinase dependente de cálcio/calmodulina IIα (CaMKⅡα)/ proteína de ligação ao elemento de resposta cAMP (CREB)