O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da fórmula养精种玉汤 na via de sinalização SIRT1/PGC-1α, que regula a biogênese mitocondrial e o estresse oxidativo em ratos com reserva ovariana diminuída (DOR) induzida por ciclofosfamida, e explorar seus mecanismos de melhoria da função da reserva ovariana e desenvolvimento folicular. Foram selecionadas 42 ratas SD fêmeas de 8 semanas com ciclo estral normal, distribuídas aleatoriamente em grupo controle (7 ratos) e grupo modelo (35 ratos). O grupo modelo foi submetido a uma injeção intraperitoneal única de ciclofosfamida (90 mg/kg), com observação por 7 dias para avaliar o sucesso do modelo com base em desordens do ciclo estral. Após sucesso do modelo, foram administrados valerato de estradiol (0,09 mg/kg) e养精种玉汤 em doses alta, média e baixa (19,98, 9,99, 5,00 g/kg), enquanto os grupos controle e modelo receberam volume equivalente de água destilada. A administração oral foi feita uma vez ao dia durante 4 semanas. Durante o experimento, foram observados e registrados o estado geral, a massa corporal e a massa úmida ovariana, e calculado o índice do órgão ovariano. Os níveis séricos de FSH, LH, estradiol (E2), hormônio antimülleriano (AMH), bem como as atividades de superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GSH-Px) foram medidos por ELISA. A coloração com hematoxilina-eosina (HE) foi usada para observar alterações morfológicas do tecido ovariano e o estado do desenvolvimento folicular. A imunofluorescência detectou os níveis de expressão de espécies reativas de oxigênio (ROS). A análise colorimétrica mediu os conteúdos de ATP e MDA no tecido ovariano. A PCR em tempo real quantificou o número de cópias de DNA mitocondrial (mtDNA) e a expressão de mRNA de genes-chave como SIRT1, PGC-1α, NRF1 e TFAM. O Western blot avaliou os níveis de expressão de proteínas SIRT1, PGC-1α, NRF1 e TFAM. Em comparação ao grupo controle, o grupo modelo apresentou distúrbios do ciclo estral, redução significativa de peso corporal e índice ovariano (P<0,05), afinamento do córtex, estrutura frouxa, diminuição significativa no número de folículos primordiais e em crescimento (P<0,01), aumento significativo dos níveis séricos de FSH e LH (P<0,01), redução significativa de E2 e AMH (P<0,05, P<0,01), redução significativa do conteúdo de ATP e número de cópias de mtDNA (P<0,01), aumento da expressão de ROS e MDA, redução das atividades de SOD e GSH-Px (P<0,05, P<0,01), e redução da expressão de mRNA e proteínas de SIRT1, PGC-1α, NRF1 e TFAM (P<0,05, P<0,01). Após o tratamento, os grupos tratados com养精种玉汤 mostraram recuperação significativa do peso corporal e índice ovariano (P<0,05), aumento dos níveis séricos de E2 e AMH, redução dos níveis de FSH e LH (P<0,05, P<0,01), aumento do conteúdo de ATP e número de cópias de mtDNA nos ovários, redução dos níveis de ROS e MDA, aumento das atividades das enzimas antioxidantes SOD e GSH-Px (P<0,05, P<0,01), e aumento da expressão genética e proteica associada à via SIRT1/PGC-1α/NRF1/TFAM (P<0,05, P<0,01). A coloração HE mostrou restauração progressiva da estrutura ovariana, aumento significativo no número de folículos primordiais e em crescimento (P<0,05, P<0,01), arranjo ordenado das células da granulosa e melhora evidente da função ovariana. Conclusão:养精种玉汤 pode melhorar a função ovariana em ratos com DOR ativando a via SIRT1/PGC-1α, promovendo a biogênese mitocondrial, melhorando a função mitocondrial e aliviando os danos causados pelo estresse oxidativo.

养精种玉汤; insuficiência da reserva ovariana; via SIRT1/PGC-1α; estresse oxidativo; mitocôndrias