O objetivo é explorar o mecanismo pelo qual a fórmula para tonificar os rins e ativar o sangue regula a via de sinalização da proteína reguladora de glicose 78 (GRP78)/quinase do retículo endoplasmático semelhante à proteína quinase R (PERK)/fator de transcrição ativado 4 (ATF4) para melhorar a disfunção cognitiva em ratos modelo de oclusão bilateral da artéria carótida comum (2-VO). Método: foi estabelecido um modelo de demência vascular (VD) em ratos utilizando o método 2-VO. Setenta e duas ratas macho SD foram divididas aleatoriamente em grupos sham, modelo, donapezil cloridrato (0,45 mg·kg^-1), e grupos de baixa, média e alta dose da fórmula para tonificar os rins e ativar o sangue (8,90, 17,80, 35,60 g·kg^-1), com 12 ratos por grupo. A capacidade de aprendizagem e memória dos ratos foi avaliada pelo teste do labirinto aquático de Morris; o nível cognitivo foi examinado pelo teste de reconhecimento de objetos novos; as alterações estruturais e morfológicas do tecido do hipocampo foram observadas por coloração de hematoxilina-eosina (HE) e Nissl; a morfologia do retículo endoplasmático nos neurônios do hipocampo foi observada por microscopia eletrônica de transmissão (TEM); a colocalização do núcleo de proteína neuronal (NeuN) com GRP78, βⅢ tubulina com GSDMD foi detectada por imunofluorescência; os níveis de expressão de proteínas relacionadas ao estresse do retículo endoplasmático (ERS), como GRP78, PERK, ATF4, PERK fosforilado (p-PERK), proteína homóloga C/EBP (CHOP), NLRP3, caspase-1 e GSDMD foram detectados por Western blot. Resultados: em comparação com o grupo sham, o grupo modelo apresentou um tempo latente de fuga significativamente prolongado (P<0,01), número significativamente reduzido de travessias da plataforma e tempo de permanência no quadrante alvo (P<0,01); índice de reconhecimento significativamente reduzido (P<0,01); desorganização, diminuição do número de neurônios do hipocampo, corpo celular deformado e encolhido, núcleo profundamente corado; número significativamente reduzido de corpos de Nissl; redução evidente do retículo endoplasmático, com expansão e edema anormais, desaparecimento da estrutura dobrada normal; colocalização fluorescente de NeuN com GRP78, βⅢ tubulina com GSDMD significativamente aumentada; níveis de expressão das proteínas GRP78, p-PERK/PERK, ATF4, CHOP, NLRP3, GSDMD e caspase-1 significativamente aumentados (P<0,01). Em comparação com o grupo modelo, o grupo donapezil e os grupos de dose média e alta da fórmula apresentaram redução significativamente do tempo latente de fuga (P<0,01), aumento significativo do número de travessias da plataforma (P<0,05, P<0,01); aumento significativo do tempo de permanência no quadrante da plataforma (P<0,05, P<0,01); aumento significativo do índice de reconhecimento (P<0,01); aumento do número de neurônios do hipocampo, disposição celular mais próxima, redução da coloração profunda do núcleo, aumento do número de corpos de Nissl e morfologia mais próxima do normal; aumento do retículo endoplasmático no grupo de dose alta, com restauração da estrutura dobrada; colocalização fluorescente de NeuN com GRP78, βⅢ tubulina com GSDMD significativamente reduzida; no grupo donapezil, aumento significativo da expressão proteica de GRP78, ATF4, CHOP (P<0,01), expressão proteica de p-PERK/PERK significativamente reduzida (P<0,05); no grupo de baixa dose da fórmula, aumento significativo da expressão de GRP78, p-PERK/PERK, CHOP (P<0,05, P<0,01); nos grupos de dose média e alta, redução significativa da expressão proteica de p-PERK/PERK, ATF4, CHOP (P<0,01); no grupo de dose alta, redução significativa da expressão proteica de GRP78 (P<0,01); no grupo donapezil, aumento significativo da expressão proteica de caspase-1 (P<0,01) e redução significativa da expressão proteica de NLRP3 (P<0,01); no grupo de baixa dose da fórmula, aumento significativo da expressão proteica de GSDMD (P<0,01) e redução significativa da expressão proteica de NLRP3 (P<0,01); após o tratamento com doses médias e altas da fórmula, os níveis de expressão das proteínas NLRP3, GSDMD e caspase-1 foram significativamente reduzidos (P<0,01). Conclusão: A melhora da função cognitiva pela fórmula para tonificar os rins e ativar o sangue nos ratos modelo 2-VO pode estar relacionada à regulação da via de sinalização GRP78/PERK/ATF4, à melhora do estresse do retículo endoplasmático e à inibição da piroptose neuronal.

Fórmula para tonificar os rins e ativar o sangue; Demência vascular; Estresse do retículo endoplasmático; Proteína reguladora de glicose 78 (GRP78)/quinase do retículo endoplasmático semelhante à proteína quinase R (PERK)/fator de transcrição ativado 4 (ATF4); Lesão neuronal