Mecanismo de ação antifibrótico hepático da decocção Yinqi Sanhuang Jiedu pela inibição das armadilhas extracelulares de neutrófilos

LI Yanbo ,  

LEI Chao ,  

WU Qingjuan ,  

LYU Wenliang ,  

摘要

O objetivo é verificar o efeito terapêutico da decocção Yinqi Sanhuang Jiedu (YQSH) no modelo murino de fibrose hepática induzida por tetracloreto de carbono (CCl₄) e explorar se seu efeito está relacionado à inibição da infiltração de neutrófilos e à formação das armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs). Método: 36 camundongos C57BL/6J foram divididos aleatoriamente em grupo normal, grupo modelo, grupo de medicamento positivo silimarina (SF) (55 mg·kg⁻¹·d⁻¹), grupos de baixa (YQSH-L), média (YQSH-M) e alta dose (YQSH-H) de YQSH (8,325, 16,65, 33,3 g·kg⁻¹·d⁻¹), com 6 camundongos em cada grupo. Exceto pelo grupo normal, os demais receberam injeção intraperitoneal de CCl₄ para indução da fibrose hepática. Após o sucesso do modelo, os grupos tratados receberam a medicação correspondente via gavagem por 8 semanas. Colorações com hematoxilina-eosina (HE), vermelho Sirius e Masson foram usadas para observar alterações patológicas no tecido hepático; um sistema Doppler colorido foi utilizado para medir a elasticidade hepática; imunohistoquímica e PCR em tempo real (Real-time PCR) foram usadas para detectar a expressão e o nível de mRNA de CXCL1, CXCL2 e CXCL5; citometria de fluxo foi utilizada para medir o nível de neutrófilos; imunofluorescência (IF) foi utilizada para observar a expressão positiva das proteínas elastase neutrofílica (NE) e mieloperoxidase (MPO); e ELISA para medir o conteúdo de MPO, NE e histona H3 citrulinada (CitH3). Resultados: em comparação com o grupo normal, o grupo modelo apresentou infiltração significativa de células inflamatórias e depósito de colágeno no fígado, valores de elasticidade hepática, expressão de CXCL1, CXCL2 e CXCL5, níveis de neutrófilos, MPO, NE e CitH3 aumentados significantemente (P<0,05, P<0,01). Em comparação com o grupo modelo, o tratamento com YQSH reduziu a infiltração de células inflamatórias e o depósito de colágeno no tecido hepático; diminuiu a elasticidade hepática (P<0,01); reduziu a expressão proteica de CXCL1, CXCL2 e CXCL5 (P<0,01) e níveis de mRNA (P<0,05, P<0,01); diminuiu os níveis de neutrófilos (P<0,01); reduziu significativamente a expressão positiva das proteínas MPO e NE (P<0,05, P<0,01); e diminuiu os níveis de MPO, NE e CitH3 (P<0,05, P<0,01). Conclusão: o efeito antifibrótico do YQSH pode estar relacionado à inibição dos níveis de quimiocinas (CXCL1, CXCL2, CXCL5), à redução da infiltração de neutrófilos e à supressão da formação de NETs.

关键词

fibrose hepática;Yinqi Sanhuang Jiedu;neutrófilos;armadilhas extracelulares de neutrófilos;quimiocinas

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