O objetivo é explorar a base material farmacodinâmica e o mecanismo de ação do efeito anti-inflamatório da fórmula Bu Shen Tong Du. O método utiliza cromatografia líquida ultrarrápida combinada com armadilha de íons linear e armadilha electromagnética Orbitrap de alta resolução (UPLC-LTQ-Orbitrap-MS) para identificar sistematicamente os componentes químicos da fórmula e os seus componentes absorvidos no sangue in vivo. A farmacologia de rede foi utilizada para selecionar os componentes ativos no sangue e os alvos potenciais, construir uma rede PPI dos alvos centrais, analisar o enriquecimento de alvos interseccionais, e validar a capacidade de ligação dos componentes chave aos alvos com acoplamento molecular. Foi estabelecido um modelo inflamatório in vivo usando peixes-zebra transgénicos Tg(mpx:GFP), e, aos 3 dias pós-fertilização (3 dpf), os alevins foram divididos aleatoriamente em grupo branco, grupo modelo, grupo positivo com acetato de dexametasona (75 μmol·L^-1), e grupos com concentrações baixa, média e alta da fórmula (500, 1000, 2000 mg·L^-1). Foi observada a distribuição e quantidade de neutrófilos no saco vitelino sob microscopia de fluorescência. A PCR quantitativa em tempo real foi utilizada para detectar os níveis de expressão de mRNA dos genes-chave da via de sinalização Toll-like receptor 4 (TLR4)/MyD88/transcrição nuclear fator-κB (NF-κB) e fatores inflamatórios interleucina (IL)-1β, IL-6 e fator de necrose tumoral-α (TNF-α). Os resultados identificaram 120 componentes químicos na fórmula, confirmando-se 26 protótipos por métodos farmacocinéticos. A farmacologia de rede selecionou 227 alvos interseccionais entre artrite reumatoide (AR) e componentes em sangue, sugerindo que alcaloides como brucina, estriquinina, sinigrina, glucósido amargo de rehmannia, cinamaldeído e metilefedrina atuam nas principais alvos quinase B1 (Akt1), fator de ativação de sinal e transcrição 3 (STAT3), fator de necrose tumoral (TNF), TLR4, MAPK14 e subunidade catalítica α da fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-quinase (PIK3CA), regulando as vias de sinalização TLR4 e NF-κB para exercer efeito anti-inflamatório. A validação in vivo em peixe-zebra demonstrou que a concentração máxima tolerada da fórmula é de 2000 mg·L^-1. Em comparação com o grupo branco, o grupo modelo apresentou aumento significativo na infiltração de neutrófilos no saco vitelino (p<0,01) e aumento na expressão de mRNA de TLR4, MyD88, NF-κB, TNF-α, IL-6 e IL-1β (p<0,05, p<0,01); comparado ao grupo modelo, os grupos com concentrações média e alta da fórmula e o grupo do acetato de dexametasona reduziram significativamente o número de neutrófilos (p<0,05, p<0,01), enquanto o grupo de baixa dose não mostrou diferenças estatísticas significativas, havendo uma redução significativa na expressão de mRNA de TLR4, MyD88, NF-κB, TNF-α, IL-6 e IL-1β (p<0,05, p<0,01). Conclusão: A base farmacodinâmica da fórmula Bu Shen Tong Du foi preliminarmente identificada e confirmou-se que exerce seu efeito anti-inflamatório através da via de sinalização TLR4/MyD88/NF-κB, fornecendo uma base experimental científica para futuras aplicações clínicas.

Fórmula Bu Shen Tong Du; modelo de inflamação em peixe-zebra; receptor Toll-like 4 (TLR4); fator de diferenciação mieloide 88 (MyD88); fator nuclear de transcrição-κB (NF-κB)