O objetivo é analisar o grau de lesão no tônus muscular em ratos com espasticidade dos membros após AVC, bem como a expressão da proteína Nestin e β-catenina na região cortical M1 do cérebro, explorando o mecanismo de ação da decocção de Paeonia e Glycyrrhiza em diferentes doses em ratos com espasticidade dos membros (SCA). Métodos: Os ratos foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo modelo, grupo positivo (baclofeno, 5,25 mg·kg-1) e grupos com doses baixa, média e alta da decocção (2,1, 4,2, 8,4 g·kg-1), com 9 ratos por grupo. O modelo de espasticidade pós-AVC foi criado utilizando o método modificado de fototrombose combinado com injeção de etanol anidro na cápsula interna. Após confirmar o sucesso do modelo por escore comportamental, foi realizada intervenção medicamentosa. Foram avaliados o déficit neurológico e o tônus muscular por meio de testes comportamentais, a distância de movimento em campo aberto, a estrutura sináptica por microscopia eletrônica de transmissão, as alterações nas fibras musculares esqueléticas por coloração de ATPase, as alterações morfológicas dos tecidos por coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica, reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real e Western blot para medir os níveis de mRNA e proteínas Nestin e β-catenina na região cortical M1. Resultados: Comparado ao grupo controle, o grupo modelo apresentou aumento significativo nos escores de déficit neurológico e tônus muscular (P<0,01), redução significativa na distância de movimento em campo aberto (P<0,01), inchaço e desfocagem das estruturas sinápticas, danos graves às células do córtex cerebral, aumento significativo na proporção de fibras musculares ATPase tipo I (P<0,01), diminuição significativa nos níveis de mRNA e proteína Nestin (P<0,01) e aumento significativo nos níveis de mRNA e proteína β-catenina (P<0,01). Em comparação ao grupo modelo, a decocção reduziu significativamente os escores de déficit neurológico e tônus muscular nos ratos SCA (P<0,01) e aumentou significativamente a distância de movimento (P<0,01). A microscopia eletrônica de transmissão revelou estruturas sinápticas mais claras e intactas no grupo tratado com decocção, com maior número de vesículas e melhor morfologia; a coloração HE mostrou estrutura neuronal intacta, disposição ordenada e redução no número de células vacuolizadas; a coloração ATPase mostrou redução na proporção de fibras tipo I (P<0,01); a PCR em tempo real demonstrou aumento significativo da expressão de mRNA Nestin e β-catenina (P<0,01); a imuno-histoquímica e Western blot indicaram aumento notável na expressão das proteínas Nestin e β-catenina (P<0,05, P<0,01). Conclusão: A decocção de Paeonia e Glycyrrhiza pode melhorar o dano neurológico e a espasticidade dos membros no modelo SCA, regulando a proliferação e diferenciação das células-tronco neurais na região cortical M1.
关键词
decocção de Paeonia e Glycyrrhiza;AVC;espasticidade dos membros;células-tronco neurais;diferenciação celular