Mecanismo pelo qual a fórmula Qi Jiang Yi Mai regula FGF21/AMPK para melhorar a mitofagia e retardar o envelhecimento vascular em ratos com diabetes tipo 2
Objetivo: observar o efeito da fórmula Qi Jiang Yi Mai no envelhecimento vascular, na via de sinalização do fator de crescimento de fibroblastos 21/quinase ativada por AMP (FGF21/AMPK) e na mitofagia em ratos com diabetes tipo 2 (T2DM). Métodos: 48 ratos SD machos de nível SPF, sendo 8 aleatoriamente selecionados como grupo controle, e os restantes 40 submetidos a uma dieta rica em açúcar e gordura combinada com baixa dose de estreptozotocina (STZ) para induzir o modelo de ratos T2DM. Os ratos foram divididos em grupo modelo, grupos de baixa, média e alta dose da fórmula Qi Jiang Yi Mai (3,72, 7,44, 14,88 g·kg-1), grupo metformina (132,9 mg·kg-1), com 8 ratos em cada grupo, e administrados por gavagem as doses correspondentes da fórmula Qi Jiang Yi Mai e metformina. Os grupos controle e modelo receberam volume equivalente de água destilada por gavagem, durante 8 semanas consecutivas. A coloração de hematoxilina-eosina (HE) foi usada para observar alterações patológicas nos tecidos vasculares, o ensaio imunoenzimático (ELISA) detectou micropartículas endoteliais (EMPs) e o fenótipo secretor associado ao envelhecimento (SASP) nos tecidos vasculares. A imunohistoquímica (IHC) foi usada para detectar a expressão das proteínas p53 e p21 nos tecidos vasculares, o western blot e PCR quantitativo em tempo real foram usados para detectar a expressão de proteínas e mRNA de FGF21, receptor do fator de crescimento dos fibroblastos 1 (FGFR1), proteína β-Klotho (KLB), quinase B1 do fígado (LKB1), AMPK fosforilado (p-AMPK), AMPK, quinase sérina/treonina induzida por PTEN (PINK1), ligase de ubiquitina E3 (Parkin) e proteína p62. Resultados: comparado com o grupo controle, o grupo modelo apresentou alterações patológicas de envelhecimento nos tecidos vasculares das artérias carótidas comuns, aumento significativo dos EMPs séricos (P<0,01), elevação significativa dos níveis de IL-1β, IL-8, MMP-1, MMP-9 nos tecidos vasculares (P<0,01), aumento significativo da expressão das proteínas p53 e p21 (P<0,05, P<0,01), diminuição significativa das expressões proteicas e de mRNA de FGF21, FGFR1, KLB, LKB1, p-AMPK/AMPK, PINK1, Parkin (P<0,01), aumento significativo da expressão proteica e de mRNA de p62 (P<0,01). Comparado ao grupo modelo, todos os grupos de tratamento apresentaram melhoria em diferentes graus das alterações patológicas de envelhecimento nos tecidos vasculares das artérias carótidas comuns, redução significativa dos EMPs séricos e do SASP vascular (P<0,01), redução significativa da expressão das proteínas p53 e p21 (P<0,05, P<0,01), aumento significativo das expressões proteicas e de mRNA de FGF21, FGFR1, KLB, LKB1, p-AMPK, AMPK, PINK1, Parkin (P<0,05, P<0,01), redução significativa da expressão proteica e de mRNA de p62 (P<0,05, P<0,01). Conclusão: a fórmula Qi Jiang Yi Mai pode intervir no envelhecimento vascular e nos danos inflamatórios em ratos com T2DM, provavelmente por meio da regulação positiva da via de sinalização FGF21/AMPK e da melhoria da mitofagia.
关键词
fórmula Qi Jiang Yi Mai; diabetes tipo 2; envelhecimento vascular; fator de crescimento de fibroblastos; mitofagia