O objetivo é verificar, por meio da farmacologia de rede e experimentos in vivo, os compostos ativos potenciais e os mecanismos de ação da fórmula Canqi Dihuang Tang no tratamento da doença renal diabética (DKD). O método utilizou cromatografia líquida ultraeficiente acoplada à espectrometria de massas de alta resolução (UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) para identificar os principais componentes químicos ativos, combinados com anotações de ontologia gênica (GO) e base de dados Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) para prever os possíveis mecanismos de ação. Foi estabelecido um modelo de DKD em camundongos machos db/db, divididos aleatoriamente em grupos: modelo, baixa dose (6,10 g/kg), dose média (12,19 g/kg) e alta dose (24,38 g/kg) de Canqi Dihuang Tang, grupo dapagliflozina (1,25 mg/kg), além de um grupo controle normal com camundongos machos C57BL/6J, administrados por 8 semanas. Durante o tratamento, foram monitorados peso corporal, glicemia em jejum (FBG), e realizados testes de tolerância à glicose oral (OGTT) e tolerância à insulina (ITT). Foram medidos níveis séricos de creatinina (SCr), nitrogênio ureico (BUN), ácido úrico (UA), albumina (ALB) e proteína total (TP), bem como a proteína urinária de 24 horas. A histologia renal foi avaliada por colorações HE, PAS e Masson; imunohistoquímica foi usada para observar a expressão de proteína renal (Nephrin); Western blot foi realizado para detectar a expressão de TGF-β1, Smad2/3, α-actina do músculo liso (α-SMA), N-Caderina e Snail, proteínas relacionadas à transição epitelial-mesenquimal (EMT). Os resultados identificaram 384 compostos ativos na extração aquosa, selecionando 44 componentes-chave baseados na biodisponibilidade oral ≥30% e regras de propriedades farmacológicas, correspondendo a 169 alvos relacionados a DKD, incluindo TNF, IL-6, Akt1, Caspase-3, c-Jun, HIF-1α, Bcl-2, MMP-9, IL-1β e TGF-β1. A anotação GO mostrou enriquecimento significativo em microdomínios de membrana, matriz extracelular com colágeno, fatores de transcrição ligados ao DNA, ligação a R-Smad e proteínas Smad, além de processos biológicos como resposta ao lipopolissacarídeo (LPS) e cicatrização. As vias KEGG indicaram enriquecimento em lipídios e aterosclerose, sinalização TGF-β e vias PI3K/Akt. Os experimentos in vivo mostraram que o grupo de alta dose reduziu significativamente o FBG (P<0,01), melhorou OGTT e ITT (P<0,01), diminuiu SCr, BUN, UA e proteína urinária 24h (P<0,01), e aumentou ALB e TP (P<0,01). A coloração patológica revelou redução significativa na área da matriz mesangial glomerular e depósito de colágeno (P<0,01), e aumento na expressão positiva de Nephrin (P<0,01). O Western blot indicou redução significativa na expressão de TGF-β1 e Smad2/3 (P<0,01), além da inibição dos níveis proteicos de α-SMA, N-Caderina e Snail (P<0,01). Conclusão: Canqi Dihuang Tang pode melhorar a fibrose renal associada à DKD, inibindo o eixo de sinalização TGF-β1/Smad e bloqueando o processo EMT, necessitando de mais estudos para elucidar seus componentes ativos chave e potencial de tradução clínica.

Canqi Dihuang Tang; doença renal diabética; fibrose renal; transição epitelial-mesenquimal; fator de crescimento transformador β1 (TGF-β1)/Smad