O objetivo é investigar se a sopa Huanglian Jiedu pode inibir a infiltração de neutrófilos no cérebro de camundongos com oclusão da artéria cerebral média (MCAO) através da regulação da expressão de quimiocinas relacionadas aos neutrófilos nos exossomos, alcançando assim um efeito terapêutico. Método: 130 camundongos machos SPF C57BL/6J foram randomizados em 4 grupos: grupo cirurgia falsa, grupo modelo MCAO, grupo sopa Huanglian Jiedu (6 g·kg^-1) e grupo Jinnaduo (21,6 mg·kg^-1), sendo o grupo Jinnaduo composto por 10 camundongos, e os demais 3 grupos por 40 camundongos cada. Os grupos de sopa Huanglian Jiedu e Jinnaduo receberam administração oral diária com volume de 0,15 mL·(10 g)^-1 do medicamento correspondente por 7 dias consecutivos, enquanto os grupos cirurgia falsa e modelo receberam a mesma quantidade de solução salina pela mesma via. Após 7 dias, foi realizada a cirurgia de oclusão da artéria cerebral média nos camundongos, ligando as extremidades distal e proximal da artéria carótida comum direita (CCA), sendo feita uma pequena incisão entre as ligaduras e inserido um monofilamento revestido com silicone de cabeça arredondada para obstruir a artéria. O monofilamento foi mantido por 1 hora para estabelecer o modelo de isquemia cerebral focal. Após 24 horas da modelagem, foram realizadas avaliações: escore de déficit neurológico (escore Longa) para determinar o estado neurológico, coloração TTC para detectar o volume do infarto cerebral, imagem laser de manchas para observar o fluxo sanguíneo cerebral, coloração HE e Nissl para observar alterações patológicas no tecido cerebral. Os exossomos foram isolados do plasma e tecido cerebral por ultracentrifugação e fracionamento por tamanho, identificados por microscopia eletrônica de transmissão (TEM), medição de tamanho e Western blot. Foi construída a biblioteca e realizado o sequenciamento do RNA longo dos exossomos. A PCR em tempo real foi usada para detectar a expressão de mRNA de fatores inflamatórios e quimiocinas relacionadas aos neutrófilos nos exossomos do plasma e tecido cerebral das diferentes grupos, o ELISA para detectar a expressão protéica correspondente, e a imunohistoquímica para detectar a expressão da mieloperoxidase específica de neutrófilos (MPO) no cérebro. Resultados: em comparação com o grupo cirurgia falsa, o grupo modelo apresentou redução significativa na pontuação neurológica (P<0,01), infarto cerebral significativo (P<0,01), redução notável do fluxo sanguíneo cerebral (P<0,01), necrose celular cerebral, diminuição significativa do número de corpos de Nissl (P<0,01), aumento significativo da expressão de mRNA de IL-1β, MPO, CXCL1, CXCL2, CXCL3, CXCL10, CCL2 e CCL3 nos exossomos do plasma e tecido cerebral (P<0,05, P<0,01), aumento significativo da expressão protéica de IL-1β, MPO, CXCL2 e CXCL10 nos exossomos do tecido cerebral (P<0,05, P<0,01), aumento da taxa de positividade da proteína MPO e da densidade óptica média no cérebro (P<0,01). Em comparação com o grupo modelo, os grupos de sopa Huanglian Jiedu e Jinnaduo mostraram aumento significativo na pontuação neurológica (P<0,05), redução significativa do volume do infarto cerebral (P<0,01), restabelecimento significativo do fluxo sanguíneo cerebral (P<0,01), redução das células necróticas e aumento significativo no número de corpos de Nissl (P<0,01). No grupo sopa Huanglian Jiedu, a expressão de mRNA dos fatores mencionados foi significativamente reduzida nos exossomos do plasma e tecido cerebral (P<0,05, P<0,01), assim como a expressão protéica nos exossomos do tecido cerebral e a positividade da proteína MPO e densidade óptica no cérebro (P<0,01). Conclusão: a sopa Huanglian Jiedu pode regular efetivamente a expressão de quimiocinas relacionadas aos neutrófilos em exossomos do plasma e tecido cerebral de camundongos com MCAO, reduzindo assim a infiltração de neutrófilos no cérebro e alcançando um efeito terapêutico.

Sopa Huanglian Jiedu;acidente vascular cerebral isquêmico;exossomos;quimiocinas;infiltração de neutrófilos