O objetivo é investigar o efeito inibitório da quercetina nas células de carcinoma hepatocelular (CHC) e seu possível mecanismo de ação através da via glicolítica. Diferentes concentrações de quercetina (0~500 μmol·L⁻¹) foram utilizadas para tratar as células Huh-7 e MHCC-97H do CHC. A viabilidade celular foi detectada pelo método CCK-8 e a concentração inibitória mediana (CI50) calculada para determinar a faixa de intervenção. As células foram divididas em grupo controle, grupo DMSO e grupos de baixas, médias e altas concentrações de quercetina. A proliferação, migração e invasão celular foram avaliadas respectivamente por experimentos de formação de colônias, cicatrização de arranhões e Transwell. Genes diferencialmente expressos (DEGs) foram analisados por RNA-seq, com análises de enriquecimento funcional GO e KEGG, construção de rede de interação proteína-proteína (PPI) e seleção de alvos potenciais pelo algoritmo EPC. A captação de glicose foi detectada por sonda fluorescente, a produção de lactato por método colorimétrico, e a expressão de mRNA e proteína dos alvos potenciais por PCR em tempo real e Western blot respectivamente. Os resultados mostraram que a quercetina inibe a proliferação das células CHC dependente da concentração e do tempo (p<0,01). Os valores de CI50 das células Huh-7 foram 231,0, 94,3 e 75,4 μmol·L⁻¹ às 24, 48 e 72 horas respectivamente, e para as células MHCC-97H foram 588,8, 184,1 e 132,0 μmol·L⁻¹; simultaneamente, reduziu significativamente o número de colônias, o número de células migrantes e invasoras no Transwell e a taxa de migração no ensaio de cicatrização (p<0,01), além de inibir claramente a captação de glicose e a produção de lactato (p<0,01). O RNA-seq selecionou 821 DEGs, dos quais 399 foram regulados positivamente e 422 negativamente (│log2FC│≥1, p corrigido<0,05). A análise de agrupamento hierárquico mostrou uma separação clara entre os grupos; a análise GO indicou que os DEGs estavam principalmente enriquecidos na resposta à hipoxia, regulação do nível de oxigênio e metabolismo do piruvato; componentes celulares concentrados na matriz extracelular contendo colágeno e na face externa da membrana plasmática; funções moleculares relacionadas à ligação a ácidos carboxílicos e atividade de liasa (p<0,05). A análise KEGG evidenciou um enriquecimento significativo em glicólise/gliconeogênese, metabolismo do carbono e via de sinalização do fator induzido por hipoxia-1 (HIF-1) (p<0,05). A combinação de PPI e algoritmo EPC selecionou 6 genes centrais da glicólise: SLC2A1, PKM, PGK1, ENO2, ALDOA e GPI. Resultados de PCR em tempo real e Western blot confirmaram a redução dependente da concentração na expressão de mRNA e proteína desses 6 genes em dois tipos de células tumorais (p<0,01). Conclusão: A quercetina reduz a expressão de genes glicolíticos chave como SLC2A1, PKM e PGK1, inibindo a atividade glicolítica e a proliferação, migração e invasão das células CHC, bloqueando assim a progressão maligna do carcinoma hepatocelular e sugerindo seu potencial valor como candidato natural anticancerígeno.

quercetina;carcinoma hepatocelular;glicólise;resposta à hipoxia;membro da família de transportadores de solutos 2 (SLC2A1);quinase de piruvato M (PKM);quinase de fosfoglicerato 1 (PGK1)