Целью настоящего исследования является выявление влияния регуляции микробиома кишечника медиаторами биологического ответа CD8⁺ T-лимфоцитов, обусловленного методом детоксикации Сяньлиань на иммунный ответ против рака толстой кишки (CRC). Методы. 30 самцовых мышей BALB/c были разделены на группы: нормальная группа, модельная группа, группа оксалиплат≤8×10^-3 г·кг^-1·（3 дней）^-1≥, высокодозная группа и низкодозная группа Сяньлиань, препараты были введены подкожно после создания модели трансплантатного опухолевого рака толстой кишки методом подкожного введения клеток CT-26, и оказана соответствующая терапия. С другой стороны, 10 самцовых мышей BALB/c были разделены на группы: группа трансплантации микробиома кишечника Сяньлиань (XFMT) и группа трансплантации микробиома кишечника модели (MFMT), с помощью комбинированного раствора четырех антибиотиков был осуществлен сброс населения постоянных микроорганизмов в кишечнике мышей, после чего создана модель безмикробиомного трансплантатного опухолевого рака толстой кишки. Был собран фекальный материал мышей группы модели и высокодозной группы метода Сяньлиань в качестве материала для подготовки фекальной жидкости. Группа XFMT получила через зонд высочайшую дозу метода Сяньлиань для лечения опухолей CRC, группа MFMT получила через зонд фекальную жидкость группы модели рака CRC. Осуществлялось постоянное наблюдение за изменением объема опухоли мышей; ткань опухоли мышей подвергалась окрашиванию гематоксилином и эозином (H&E) с целью оценки патоморфологических изменений ткани опухоли; изменения в микробиоме кишечной трансверсальной участи были проанализированы методом секвенирования полной длины PacBio; изменения в количестве клеток T в ткани опухоли были измерены с использованием потоковой цитометрии и иммунофлуоресцентной окраски; уровень интерферона-гамма (IFN-гамма) в ткани опухоли был измерен методом ферментносвязанной иммуносорбентной анализа (ELISA). Результаты. По сравнению с модельной группой, у мышей группы оксалиплат и группы высокой и низкой доз Сяньлиань значительно уменьшился объем трансплантатной опухоли (P<0,01). Окраска H&E показала, что по сравнению с модельной группой, площадь некроза в ткани опухоли и, разреженность расположения клеток, а также уменьшение ядерного деления клеток в ткани опухоли увеличились в группе оксалиплат и группе высокой дозы Сяньлиань. Анализ секвенирования микробиома показал, что по сравнению с модельной группой, хоть остались уменьшения в индексах Chao1, ACEm Shannon и Simpson в группе высокой дозы метода Сяньлиань, различия не имели статистического значения. Анализ PCoA показал, что структура биоценоза, сформированная рациональным социальным и экономическим развитием, отличалась явно от нормальной группы и модельной группы, кишечной микробиом API. Сяньлиань в группе CRC мышей структура комьюнитета бактериального комьюнитета ближе к нормальной группе (P<0.01). По сравнению с нормальной группой, насыщенность вида по данным PCR в группе модели уменьшилась значительно Akkermansia muciniphila, Muribaculum intestinale, Parabacteroides goldsteinii, Bacteroides thetaiotaomicron, Parabacteroides gordonii (P<0.05, P<0.01), в то время как, содержание Duncaniella muris, Prevotellamassilia sp 002933955Prevotella sp 002933775 и Kineothrix alysoides значительно увеличено (P<0.05, P<0.01). Одновременно, по сравнению с модельной группой, в группе высокой дозы метода Сяньлиань насыщенность Akkermansia muciniphila значительно увеличилась (P<0.05), в то время как насыщенность Kineothrix alysoides значительно уменьшилась (P<0.01). Результаты анализа линейной дискриминантной анализы (LDA>4,0) показали, что в модельной группе группы En-ricinidae, Эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-эн-де-Kineothrix, Helicobacteraceae, Филмер-филмер, Гелико-бактерия, Helicobacter pylori BU, Аксинчетанию ACIDIFACIENS фиксации KINO-THRIX, Здесь мы получаем все доступные Lachnospiraceae, Clostridia, Eubacteriales, Firmicutes разбросаны вниз и вверх на группе модели; Вер-руко-мик-ро-биа, Вер-ру-ко-мик-ро-биа, Вер-ру-ко-мик-ро-биа, Akkermania, Akkermania, agosto) и содержание большинства из них значительно повыше в группе высокой дозы Сяньлиань. Кроме того, по сравнению с модельной группой, в группе высокой дозы метода Сяньлиань содержание CD8⁺ T-лимфоцитов и IFN-гамма в ткани опухоли значительно увеличилось (P<0.01), а содержание CD4⁺ T-лимфоцитов в ткани опухоли уменьшилось значительно (P<0.05). С другой стороны, по сравнению с группой MFMT, объем трансплантатной опухоли в группе XFMT уменьшился значительно (P<0.05). Окраска H&E показала увеличение площади некроза в ткани опухоли и, разреженность расположения клеток, а также уменьшение ядерного деления клеток в ткани опухоли в группе XFMT по сравнению с группой MFMT. В то же время, по сравнению с группой MFMT, индекс Shannon и Simpson группы XFMT значительно уменьшился (P<0.05, P<0.01). Результаты анализа PCoA показывают, что структура биоценоза кишечника мышей группы MFMT явно отличается от структуры биоценоза кишечника мышей группы XFMT (P<0.01). На видовом уровне содержание Akkermansia muciniphila и Phocaeicola sartorii в группе XFMT значительно увеличено по сравнению с содержанием в группе MFMT (P<0.01). Результаты анализа линейной дискриминантной анализы (LDA>4,0) показывают, что Muribaculum sp 002492595, Acetatifactbr sp 900066365, Kineothrix, Duncaniella freteriи др. Фирма в группе MFMT; Вер-ру-ко-мик-ро-биа, Вер-ру-ко-мик-ро-биа, Вер-ру-ко-мик-ро-биа, Akkermania, Akkermania muciniphila, Phocaeicola sartorii, Phocaeicola в группе XFMT. Кроме того, по сравнению с группой MFMT, в группе XFMT содержание CD8⁺ T-лимфоцитов и IFN-гамма в опухолевой ткани значительно увеличено (P<0.01). Вывод. Метод Сяньлиань, возможно, способствует восстановлению нормальной биоценоза кишечника мышей с трансплантатным опухолевым раком толстой кишки и усилению иммунного ответа медиаторами биологического ответа CD8⁺ T-лимфоцитов, оказывая антираковое действие относительно CRC.

intestinal flora;tumor immunity;colorectal cancer;Xianlian Jiedu prescription;traditional Chinese medicine