Цель исследования заключается в выявлении влияния смешанного фондового гриба и экстракта кислоты на регуляцию иммунных T-клеток (Treg) / Т17 помощи (Th17), выводимых из пациентов с острой печеночной недостаточностью, связанной с гепатитом B (HBV-ACLF), во внешней культуре. Проводится сбор периферической крови пациентов и изоляция одиночных ядерных клеток (PBMC) и расширение Treg и нереакционных CD4⁺ Т-клеток с помощью магнитных шаров, затем дифференцировка в клетки Th17 после их культивирования вне тела. Затем приготовление сыворотки фондового гриба (метод чистки), экстракта кислоты (метод нагрева) и смешанного фондового гриба и экстракта кислоты (метод дегазации и постепенного включения) и пустой сыворотки (физиологический раствор), распределение пустой группы, группы фондового гриба, группы экстракта кислоты, группы смешанного фондового гриба и экстракта кислоты и обработка клеток в каждой группе с соответствующей сывороткой. Использование технологии поточной цитометрии для анализа частоты Treg / Th17 клеток, использование техники энзимной связи (ELISA) для измерения уровня экспрессии преобразованного фактора роста - β (TGF-β), использование техники захвата кровяной шаровой клетки для определения уровня интерлейкина (IL) -10, IL-17A, фактора некроза опухоли - α (TNF-α), уровень экспрессии IL-23, использование реальной полимеразы цепной реакции в реальном времени (PCR) для измерения экспрессии мозгового фактора P3 (FoxP3), связанного с рецептором ретиноидов γt (ROR-γt), и техника иммуноотпечатки для определения уровня экспрессии FoxP3, ROR-γt. Результаты после вмешательства сыворотки фондового гриба и экстракта кислоты по методу очистки и методу нагрева и смешанной фондовой грибокий и экстракта кислоты (метод дегазации и постепенного включения) указывают, что по сравнению с пустой группой, частота Treg и Th17 клеток в группе смешанного фондового гриба и экстракта кислоты снижается, уровень TGF-β и IL-10, а также уровень TNF-α, IL-17A, IL-23 понижается, уровень экспрессии mRNA и белка FoxP3 и ROR-γt значительно снижается (P< 0,01) ; в сравнении с методом чистки, частота Treg клеток в группе смешанного фондового гриба и экстракта кислоты и уровень экспрессии mRNA и белка FoxP3 снижаются, но статистически значимых различий нет, а также снижается частота Th17 клеток и уровень TGF-β и IL-10 клеток Treg, а также уровень TNF-α, IL-17A, IL-23 клеток Th17 и уровень экспрессии mRNA и белка ROR-γt значительно снижается (P< 0,05, P< 0,01) ; в сравнении с методом нагрева, частота Treg клеток в группе смешанного фондового гриба и экстракта кислоты и уровень экспрессии mRNA и белка FoxP3 снижаются, но статистически значимых различий нет, а также снижается частота Th17 клеток и уровень TGF-β и IL-10 клеток Treg, а также уровень TNF-α, IL-17A, IL-23 клеток Th17 и уровень экспрессии mRNA и белка ROR-γt значительно снижается (P< 0,05). В заключение, смешанный фондовый гриб и экстракт кислоты могут значительно снизить экспрессию специфических транскрипционных факторов клеток Treg, умеренно тормозить активацию клеток Treg и Th17, снижать секрецию факторов TGF-β, IL-10, TNF-α, IL-17A, IL-23, что помогает смягчать воспалительные реакции, вызванные фазой острого отказа печени, и улучшает прогноз пациентов.

острая печеночная недостаточность, связанная с гепатитом B;регулятивные Т-клетки (Treg) ; помощник Т17 (Th17) ; воспалительная реакция;метод дегазации и постепенного включения