Regulating the Intestinal Damage Mediated by R-spondin1/Wnt3a and ImprovingD-Lactose Induced Digestive and Absorptive Dysfunction in Aged Rats by Huagan Granules
Цель заключается в изучении отношений между изменениями функций пищеварения и всасывания и состоянием печени у стареющих крыс в контексте сигнального пути R-spondin1/Wnt3a и особенностей действия терапии укрепления печени. Методы: 48 мужских крыс SD SPF уровня были случайным образом разделены на пустую группу, модельную группу, группы низких, средних и высоких доз лекарства для укрепления печени, группу витамина Е, по 8 в каждой группе. Помимо пустой группы, которой внутривнутренно вводили раствор физиологической соли, всем остальным группам вводили раствор D-лактозы (400 мг/кг) для создания модели стареющих крыс. Начиная с дня моделирования, группы низких, средних и высоких доз укрепляющего печень лекарства получали соответствующие водные экстракты, а группа витамина Е получала раствор токоферола (27 мг/кг), а пустая группа и модельная группа получали равное количество раствора физиологической соли (10 мл/кг). Были проведены наблюдения за общими биологическими характеристиками крыс, включая цвет шерсти, активность, массу тела, потребление воды и корма, и состояние старения оценивалось с помощью содержания малоноводородной кислоты (MDA) в сыворотке, активности супероксиддисмутазы (SOD), пероксидазы глутатиона (GSH-Px), а также сравнением с аналогичными показателями у здоровых особей. Была проверена сила хватания, содержание общего желчного кислота (TBA) и активность α-амилиазы, а также содержание глюконовых сиропов, содержание β-гала в тканях двенадцатиперстной кишки. Было проведено наблюдение за патологическим состоянием слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки крыс. Использовался иммунофлуоресцентный метод окрашивания для изучения выражения специфических для В-клеток лейкоза Молоны мыши вирус-1 (Bmi1) и белка-рецептора G-белка с повторяющимися аминокислотными последовательностями 5 (Lgr5), а также метод реального времени ПЦР для определения экспрессии ядерного антигена пролиферации опухоли двенадцатиперстной кишки (Ki67), Bmi1 и Lgr5 мРНК для оценки процессов пролиферации и регенерации, а также для определения эксперессии мРНК для R-spondin1, Wnt3a, β-катенин, гликогена-синтазыкиназа-3β (GSK-3β) в тканях двенадцатиперстной кишки методом реального времени ПЦР, и экспрессии белка R-spondin1, Wnt3a, β-катенин, фосфорилированного GSK-3β методом иммуноблотирования для анализа механизмов развития нарушений функций пищеварения и всасывания при старении крыс, а также для выявления особенностей действия лекарства для укрепления печени. Результаты: по сравнению с пустой группой, масса тела, потребление воды, употребление пищи, сила хватания, активность SOD, GSH-Px, AMY, содержание GLP-1, VIP, D-глюкозы уменьшились значительно (P<0.05), а содержание MDA, TBA, активность β-гала в тканях двенадцатиперстной кишки увеличилась значительно (P<0.05) в модельной группе. Длина и ширина кишки, глубина желудочков, значение V/C, уровни выражения мРНК Ki67, Lgr5, Bmi1, R-spondin1, Wnt3a, β-катенина значительно уменьшились (P<0.05), уровни экспересии GSK-3β и фосфорилированного GSK-3β значительно увеличились (P<0.05) в тканях двенадцатиперстной кишки в модельной группе, по сравнению с пустой группой. По сравнению с модельной группой, масса тела, потребление воды, употребление пищи, сила хватания, активность SOD, GSH-Px, AMY, содержание GLP-1, VIP, D-глюкозы увеличились значительно (P<0.05), а содержание MDA, TBA, активность β-гала в тканях двенадцатиперстной кишки уменьшилась значительно (P<0.05) в каждой группе лечения. Длина и ширина кишки, глубина желудочков, значение V/C, уровни экспрессии мРНК Ki67, Lgr5, Bmi1, R-spondin1, Wnt3a, β-катенина значительно увеличились (P<0.05), уровни экспресии GSK-3β и фосфорилированного GSK-3β значительно уменьшились (P<0.05) в тканях двенадцатиперстной кишки в каждой группе лечения. Вывод: показатели массы тела, потребления воды, употребления пищи, силы хватания, активности SOD, GSH-Px, AMY и содержания GLP-1, VIP, D-глюкозы заметно увеличились (P<0.05), а содержание MDA, TBA и активность β-гала в тканях двенадцатиперстной кишки заметно уменьшилось (P<0.05) по сравнению с модельной группой. Длина и ширина кишки, глубина желудочков, значение V/C и уровни экспрессии мРНК Ki67, Lgr5, Bmi1, R-spondin1, Wnt3a, β-катенина заметно увеличились (P<0.05), а уровни экспрессии GSK-3β и фосфорилированного GSK-3β заметно уменьшились (P<0.05) в тканях двенадцатиперстной кишки в каждой группе лечения. Стареющие крысы при состоянии дефицита печени проявляют выраженные нарушения функций пищеварения и всасывания, а терапия укрепляющего печень лекарства может улучшить повреждения пищеварительного тракта у стареющих крыс путем регулирования сигнального пути R-spondin1/Wnt3a, что может улучшить функции пищеварения и всасывания организма, что в свою очередь способствует замедлению процесса старения.
关键词
старение;дисфункция пищеварения и всасывания;R-спондин1(R-spondin1)/Wnt3a;печеночная дефицит;укрепление печени