Влияние единичных компонентов, образующих эффективную комбинацию '古方腐尽生肌散' в стимуляции ангиогенеза HUVEC на основе унифицированного дизайна

LU Xianying ,  

GAO Jing ,  

BAI Dingxi ,  

HOU Chaoming ,  

JI Wenting ,  

CHEN Huan ,  

WU Chenxi ,  

摘要

Цель унифицированного дизайна заключается в определении эффективного единичного компонента 古方腐尽生肌散-хинон-фельгра-смола ёли-смола для стимуляции заживления раненых язв сахарного диабета (DU), а также достижения современного применения античного рецепта 古方腐尽生肌散. Метод следования стратегии унифицированный дизайн-фармакологическое тестирование-математическое моделирование и проверка модели в соответствии с планом унифицированного дизайна U 14 (14 5). По 4 одиночным компонентам традиционной китайской медицины действующим фактором, пролиферацией жиловых эндотелиальных клеток человека (HUVEC) в качестве фармакологического показателя, была использована программа DPS для построения математической модели между действующими компонентами и фармакологическими показателями, и, наконец, результаты унифицированного дизайна были проверены путем использования клеточных тестов на пролиферацию и активность (ССК-8), тестов заживления ран, тестов образования трубок, иммуноблотирования белков (Western blot) и полимеразной цепной реакции с использованием реального времени (Real-time PCR). Все результаты в 14 группах, при сравнении с высоким сахаром, в 6 группах отмечалась статистически значимая разница и сильнейший стимулирующий эффект (P <0.05); после моделирования DPS было составлено 4 квадратичных уравнения Y1~Y4, для дальнейшей проверки использовались уравнения Y1~Y3>; и для повторяемости эксперимента использовались исследования 6 групп; и далее 6 группа и уравнения Y1~Y3 были переименованы как новый состав ①~ новый состав ④, для использования единичных компонентов традиционного рецепта 古方腐尽生肌散 для его современного применения. Результаты подтвердили: результаты тестов ССК-8, заживления ран, тестов образования трубок и тесты связанные с активностью, сравнительно с нулевой группой, после стимуляции HUVEC глюкозой 50 ммоль·л-1, их соответственно клеточная активность, показатель заживления ран и количество трубок значительно снизились; кроме того, был отмечен значительный спад выражения связанных с ангиогенезом факторов, таких как фактор роста сосудов (VEGF) и фактор роста фибробластов 2 (FGF2) и CD31. При воздействии составов ①~④ улучшились биологические функции после травмирования HUVEC глюкозой 50 ммоль·л-1>; дополнительно, были приняты коэффициенты исключений и относительные дозы составов ①~④, что указывает на то, что смола ёли, хинон и хинон-фельгра имеют стимулирующее воздействие на ангиогенез в высокой сахарной среде, и реализуют основной эффект (коэффициент корреляции положительный, оба >0.9); хинон и хинон-фельгра, смола ёли и хинон-фельгра и смола ёли, хинон и хинон-фельгра работают сообща в виде взаимодействия для стимуляции ангиогенеза HUVEC (коэффициент корреляции положительный). Выводы: состав ① и состав ③ представляют собой оптимальный набор, способный смягчить подавляющее воздействие высокого сахара, стимулировать пролиферацию, миграцию и способность образования трубочек HUVEC в условиях высокого сахара, стимулирующие выражение сосудистого эндотелиального фактора роста A (VEGFA), FGF2, CD31, тем самым реализуя способность к стимуляции ангиогенеза для заживления раны DU. Эти результаты не только подтверждают хорошую репродуктивность и выполнимость составов ① и составов ③, однако также представляют новый метод и путь для построения математической модели в глубоком изучении теории комбинации традиционной китайской медицины.

关键词

古方腐尽生肌散; язвы сахарного диабета; ангиогенез; унифицированный дизайн

阅读全文