Отвар Bu Zhong Yi Qi Tang регулирует стабильность митохондрий скелетных мышц воздействием PINK1

WEI Huani ,  

JIANG Ting ,  

PENG Juan ,  

JING Chunxiang ,  

LIU Wei ,  

PAN Huashan ,  

CHEN Daorui ,  

摘要

Цель исследования заключается в изучении влияния отвара Bu Zhong Yi Qi Tang на физическую усталость и потенциальные механизмы его терапевтического действия. Методы: 60 мужских мышей C57BL/6J, SPF-уровень, были случайным образом разделены на группу контроля, группу моделей, низкую, среднюю и высокую дозы Bu Zhong Yi Qi Tang (4,1, 8,2, 16,4 г/кг) и группу витамина C (0,04 г/кг). Кроме группы контроля, другие группы мышей ежедневно подвергались грудничковым упражнениям в течение 6 недель. По окончании эксперимента брали кровь, взвешивали тимус, печень, селезенку, почки и другие органы. Используя наборы реагентов, измеряли уровень молочной кислоты (LD), азота креатинина в крови (BUN), креатинкиназы (CK), малоновый диальдегид (MDA) и др. для оценки степени усталости. По лицу HE определяли патологическое строение скелетных мышц; под электронным микроскопом изучали ультраструктуру скелетных мышечных клеток, обращая внимание на изменение формы митохондрий. С помощью наборов реагентов измеряли содержание АТФ в скелетных мышцах и активность дыхательной цепи комплексов I, II и V в митохондриях скелетных мышц; с помощью метода реального времени ПЦР и иммуноблотирования определяли выражение мРНК и белка ключевых генов в пути home genes (HOX). Результаты: по сравнению с контрольной группой у мышей модельной группы заметно снизилась скорость увеличения массы тела P<0.01; индекс тимуса заметно снизился P<0.01; содержание LD, BUN и MDA в крови и активность CK заметно возросли P<0.01; по лицу HE видно нарушение порядка расположения скелетных мышц и разрыв мышечных волокон, а также значительная инфильтрация воспалительных клеток; под электронным микроскопом видно изменение формы митохондрий скелетных мышечных клеток (появление пустот в митохондриях, исчезновение заострений), а также их уменьшение в количестве; содержание и активность дыхательной цепи комплексов I, II и V в митохондриях в скелетных мышцах заметно снизились P<0.01; в связи с этим уровень экспрессии mRNA и белков PINK1, E3 убиквитин-лигаза, связанные с последовательностью YRPW, связанные с динамикой белки 1, 1-цепочечный микротрубочный белок 3B, белок p62, мРНК, связанные с индукцией гипоксии-1α явно возросли P<0.05, P<0.01; по сравнению с модельной группой, после вмешательства отваром Bu Zhong Yi Qi Tang время истощения мышей значительно увеличилось P<0.01; заметно улучшилась скорость увеличения массы тела P<0.01; тимусный индекс значительно увеличился P<0.05, P<0.01; содержание LD, BUN и MDA в крови, а также активность CK значительно уменьшились P<0.05, P<0.01; в лице HE видно, что скелетные мышцы расположены в порядке, воспалительные клетки уменьшились; под пропускным электронным микроскопом форма митохондрий в скелетных мышцах полностью, заострения митохондрий становятся более плотными, количество митохондриев увеличивается; содержание АТФ в скелетных мышцах и активность дыхательной цепи комплексов I, II и V в митохондриях скелетных мышц значительно увеличились P<0.05, P<0.01; уровень экспрессии генов PINK1, Parkin, HOX1, LC3B, Drp1 и HIF-1α в скелетных мышцах значительно возрос P<0.05, P<0.01), а уровень p62 значительно уменьшился P<0.01. Вывод: отвар Bu Zhong Yi Qi Tang способен эффективно предотвращать физическую усталость и, вероятно, путем регуляции пути стабилизации митохондрий мышц PINK1/HIF-1α/PINK1/Parkin и HIF-1α/HOX1/PINK.

关键词

физическая усталость, Бу Чжун И Чи Танг, индуцированный PTEN-киназой 1 (PINK1), стабильность митохондрий скелетных мышц, скелетные мышцы

阅读全文