Цель исследования заключается в изучении влияния комбинированного препарата Chaihu Shugan на сигнальный путь CaMKII/CREB в гиппокампе и сердечной ткани крыс-моделей ишемической болезни сердца в сочетании с депрессией, а также изучении механизма действия данного препарата в лечении ишемической болезни сердца в сочетании с депрессией. Методы: модель ишемической болезни сердца в сочетании с депрессией была подготовлена с помощью высокожировой диеты и внутрибрюшинного инъецирования изопреналина (ISO) в сочетании с хроническим непредсказуемым легким стрессом (CUMS). 108 самцовых крыс SD были случайно разделены на группу нормального состояния, группу модели, высокую, среднюю и низкую дозу (23,4, 11,7, 5,85 г/кг) комбинированного препарата Chaihu Shugan, группу ингибитора CaMKII (KN93), группу KN93 + высокую, среднюю и низкую дозу комбинированного препарата. В первый день моделирования, начиная с каждого дня до завершения моделирования, препараты были введены каждый день. В 7-8 недели, крысам из группы KN93, KN93 + высокая, средняя и низкая дозы назначались трикратные внутрибрюшинные инъекции KN93 каждую неделю. В 8-й недели моделирования все группы крыс были подвергнуты тестированию предпочтения сахарной воды, путешествию, а также поведенческому анализу на высоких столбах; были проведены наблюдения за изменениями II-распределения электрокардиограммы у крыс во всех группах; с помощью окрашивания гематоксилином-эозином (ГЭ) были проанализированы изменения в сердечной ткани крыс всех групп; при помощи ферментного анализа в крови крыс были измерены содержание триглицеридов (ТГ), общего холестерина (ТС), высокой плотности липопротеинов (HDL), низкой плотности липопротеинов (LDL) и уровень лактатдегидрогеназы (LDH); содержание креатинкиназы (КК), изофермы креатинкиназы (КК-М) в крови было измерено при помощи ультрафиолетового спектра; концентрация моноцитарно-хемотактического белка-1 (MCP-1) в сыворотке крови крыс была определена при помощи метода ферментной иммуносорбентной пробы (ELISA); с помощью метода реального времени количественной полимеразной цепной реакции (Real-time PCR) были измерены уровни мРНК CaMKII и CREB в гиппокампе и сердечной ткани; при помощи метода иммуноблотирования (Western blot) были измерены уровни CaMKII, фосфорилированного (p)-CaMKII, CREB, фосфорилированного (p)-CREB в гиппокампе и сердечной ткани. Результаты: По сравнению с группой нормального состояния, крысы в группе модели имели значительное снижение коэффициента предпочтения сахарной воды, общего пройденного пути во время путешествий, количества посещений центральной зоны во время путешествия и количества посещений открытых рукавов высоких столбов (P<0,01); на электрокардиограммах наблюдалось уклонение сегмента ST в виде серповидного подъема, окраска гематоксилином-эозином показала серьезные дегенеративные изменения и нарушение структуры миокарда, обильную инфильтрацию воспалительными клетками, содержание общего холестерина (ТС) и холестерина низкой плотности (LDL) в сыворотке крови увеличилось (P<0,01), содержание холестерина высокой плотности (HDL) значительно снизилось (P<0,01), уровень креатина киназы (КК), изофермы креатинкиназы (КК-М) и лактатдегидрогеназы (LDH) в крови существенно повысился (P<0,05, P<0,01), уровень моноцитарно-хемотактического белка-1 (MCP-1) в сыворотке крови значительно увеличился (P<00,01), мРНК CaMKII, CREB и уровень белка p-CaMKII, p-CREB в гиппокампе и сердечной ткани значительно снизились (P<0,05, P<0,01), экспрессия мРНК CaMKII и CREB и уровень белка p-CaMKII, p-CREB в сердечной ткани существенно увеличились (P<0,01). По сравнению с группой модели, крысы в группе с высокой, средней и низкой дозой комбинированного препарата Chaihu Shugan имели улучшение вышеуказанных параметров; у крыс группы KN93 было значительное снижение коэффициента предпочтения сахарной воды, общего пройденного пути во время путешествий, количества посещений центральной зоны во время путешествия и количества посещений открытых рукавов высоких столбов (P<0,01), содержание КК, КК-М, LDH и MCP-1 в крови значительно снизилось (P<0,05, P<0,01), на электрокардиограммах наблюдалось уклонение сегмента ST в виде отката, окраска гематоксилином-эозином показала уменьшение степени дегенерации миокарда и уменьшение инфильтрации воспалительными клетками, экспрессия мРНК CaMKII и CREB и уровень белка p-CaMKII, p-CREB в гиппокампе и сердечной ткани значительно снизились (P<0,05, P<0,01). У крыс группы KN93 + высокая, средняя и низкая дозы также существует улучшение вышеуказанных параметров по сравнению с группой KN93. Вывод: Комбинированный препарат Chaihu Shugan представляет собой эффективное лекарственное средство для улучшения депрессии и улучшения повреждения миокарда у крыс с ишемической болезнью сердца вероятно связано с изменениями в сигнальном пути CaMKII/CREB и лучшее действие наблюдается при высокой дозе препарата.

Chaihu Shugan; ишемическая болезнь сердца; кальцийзависимая киназа II типа (CaMKII) / связывающий белок реакции (CREB) сигнальный путь