Идентификация основных химических компонентов в Анмедане, исследование механизма действия Анмедана на улучшение циркадных ритмов бессонных крыс путем регуляции сигнального пути клеточного внеклеточного регулирующего киназы 1/2 (ERK1/2)/взаимодействие пути взаимодействия протеинкиназ серина/тирозина (MNK)/эукариотического трансляционного инициации фактора 4E (eIF4E). Методы: на основе техники сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии-линейного ионного капиллярного трапа-орбитрап-масс-спектрометрии (UPLC-LTQ/Orbitrap/MS) в сочетании со стандартными образцами идентифицируют основные химические компоненты Анмедана. 60 случайно выбранных мужских крыс SD разделяют на пустую группу, модельную группу, группу мелатонина, группы низкой, средней и высокой дозы Анмедана, по 10 штук в каждой группе, за исключением пустой группы, для установления модели бессонницы через брюшную инъекцию 3,4,5-триод-л-фенилаланина. Проведены поля-контрольный эксперимент и эксперимент по циркадным ритмам, чтобы изучить циркадные ритмы активности-покоя, структурные изменения нейронов гипоталамуса с помощью гематоксилина-эозина (HE) и ниссляной окраски, выражение мРНК и белков связанных с сигнальным путем ERK1/2/MNK/eIF4E в гипоталамусе методом иммунофлюоресцентного анализа, анализа методом реального времени полимеразной цепной реакции (Real-time PCR) и метода иммуноблотирования белков (Western blot). Результаты: В Анмедане в общей сложности обнаружено 50 химических компонентов, таких как флавоноиды, фенилпропаноиды, тритерпеноиды, алкалоиды, липиды. По сравнению с пустой группой, у модельной группы заметно увеличение общего пути движения, средней скорости, времени пребывания в центральной зоне и общего стояния с вертикальной позой (P<0,01), значительное увеличение времени активности и общего времени активности в светле и в темноте (P<0,01); на рисунке обнаружено разрежение нейронов гипоталамуса, уменьшение количества, частичное исчезновение ядер или ломка ядрышек, значительное увеличение индекса апоптоза клеток (P<0,01), помутнение цитоплазмы, светление цвета ниссляного тела, заметное увеличение индекса апоптоза ниссляного тела (P<0,01); Снижение уровней экспрессии мРНК ERK1/2, MNK, eIF4E в гипоталамусе (P<0,01), снижение уровней экспрессии белков ERK1/2, фосфорилированного (p)-ERK1/2, MNK, фосфорилированного (p)-MNK, eIF4E, фосфорилированного (p)-eIF4E (P<0,01); В сравнении с модельной группой группы с высокой дозой Анмедана заметное снижение общего пути движения, средней скорости, времени пребывания в центральной зоне и общего стояния с вертикальной позой (P<0,01), заметное снижение общего пути движения, средней скорости и общего стояния с вертикальной позой для групп с различной дозой Анмедана (P<0,01), заметное сокращение времени активности в светле для групп с разной дозировкой Анмедана (P<0,01), заметное увеличение времени активности в темноте для группы с высокой дозой Анмедана (P<0,01), заметное сокращение различий в среднем времени активности в день и в ночь для групп с разной дозировкой Анмедана, у групп с средней и высокой дозой Анмедана гипоталамические нейроны плотно расположены, количество увеличивается, индекс апоптоза клеток в гипоталамусе значительно снижается (P<0,05, P<0,01), цитоплазма четкая у групп с разной дозировкой Анмедана, у тел ниссляного окраски цветное погружение, индекс апоптоза ниссляного тела значительно снижается (P<0,01), для групп с средней и высокой дозой Анмедана в гипоталамусе уровень экспрессии мРНК и белков ERK1/2, MNK, eIF4E значительно возрастает (P<0,05, P<0,01). Выводы: Анмедан в основном включает в себя 50 химических компонентов, таких как флавоноиды, фенилпропаноиды, тритерпеноиды и т. д., и обладает преимуществами много компонентов, многопутевого 'совместного увеличения эффективности', чтобы улучшить бессонницу, может улучшить нарушение циркадных ритмов бессонных крыс, вызванное PCPA, путем повышения связанных с сигнальной дорожкой ERK1/2/MNK/eIF4E белков.

Anmeidan;circadian rhythms;Hypothalamus;extracellular signal-regulated kinase 1/2 （ERK1/2）/mitogen-activated protein kinase （MAPK）-interacting serine/threonine-protein kinase （MNK）/eukaryotic translation initiation factor 4E （eIF4E）