Целью данного исследования было изучение влияния шофрана на пролиферацию, апоптоз, выражение маркеров раковых стволовых клеток (CSC) и метаболизм в не-малоклеточном раке легкого (NSCLC) в сочетании с ингибиторами тирозинкиназы рецептора эпидермального фактора роста (EGFR-TKIs). Методы включали тест на пролиферацию и жизнеспособность клеток (CCK-8), двойную окраску клеток аннексином V-FITC/PI для изучения влияния шофрана и EGFR-TKIs на апоптоз клеток NSCLC в двух и трехмерной культуре, а также тест жизнеспособности клеток в 3D культуре с помощью анализа биолюминесценции CellTiter-Glo ۳D. С помощью техник реального времени ПЦР и иммуноблотирования изучили уровни мРНК и белка маркеров CSC - SOX2 и ALDH1A1, а также уровень окислительно-восстановительного равновесия и активный уровень кислорода в клетках с помощью флюоресцентной маркировки свободным пятивольтным лазером (FLIM) . Результаты показали, что в двумерной (2D) и 3D культуре клеток NSCLC в сравнении с контролем и EGFR-TKI в сочетании с ингибиторами тирозинкиназы рецептора эпидермального фактора роста обнаружено уменьшение жизнеспособности клеток и увеличение уровня апоптоза (P <0.05) ; в сравнении с EGFR-TKI обнаружено сокращение уровня мРНК и белка маркеров CSC (P <0.05) ; в сравнении с EGFR-TKI обнаружено увеличение окислительно-восстановительного равновесия (P <0.05), а также увеличение уровня активного кислорода. Выводы в клетках NSCLC шофран способствует увеличению окислительно-восстановительного равновесия, увеличивает уровень активного кислорода и тормозит экспрессию маркеров CSC для усиления противопухолевого действия EGFR-TKIs, что предоставляет новую молекулярную механику для усиления чувствительности к целенаправленным препаратам.
关键词
non-small cell lung cancer (NSCLC);Scutellariae Radix;epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors (EGFR-TKIs);cancer stem cells;reactive oxygen species (ROS);Redox ratio