Целью настоящего исследования было изучение механизма действия китайского препарата Хяояшукунтан (XYSKD) на формирование и выход из нейтрофильной экстрацеллюлярной ловушки (NETs) через регуляцию сигнального пути фосфоинозитида-3-киназы (PI3K)/белокиназы В (Akt)/мишень молекулы рапамицина млекопитающих (mTOR), смягчение воспалительной реакции, подавление избыточной пролиферации фибробластов в тазовом спайчивании, снижение уровня спайчивания и фиброза, механизм воздействия на целостность тканей после воспалительных заболеваний таза (SPID). Методы: 84 крысы породы Вистар были случайно разделены на группы: пустая группа, модельная группа, группа ХСКД (8 мг/кг), группа активатора мишени молекулы рапамицина млекопитающих (mTOR) (10 мг/кг), группа активатора mTOR + XYSKD (10 мг/кг + 8 мг/кг), группа ингибитора mTOR (2 мг/кг), группа ингибитора mTOR + XYSKD (2 мг/кг + 8 мг/кг), всего 7 групп. В модельной группе использовался голод и инфицирование колонии Чернышенко для создания модели крыс с SPID, после 14 дней медицинского вмешательства осуществлялось электронно-микроскопическое наблюдение шовной ткани таза, внешний вид матки, маточных труб и яичников, определение уровня интерлейкина-1β (IL-1β), интерлейкина-17 (IL-17), фактора некроза опухоли-α (TNF-α) в брюшной полости, обнаружение гипероксидазы в маточных трубах и экспрессии гистон-3 (H3) методом иммунофторесценции, определение относительного уровня экспрессии нейтрофильной эластазы (NE), молекулы межклеточной адгезии-1 (CD54), α-гладкого мышечного актина (α-SMA), гистона-3 (H3), PI3K, Akt методом иммуноферментного анализа (ELISA) и иммунофлуоресцентного анализа (Western blot) и методом реального времени полимеразной цепной реакции (Real-time PCR) в спайченной ткани таза. Результаты: по сравнению с пустой группой, в модельной группе под электронным микроскопом было обнаружено множество коллагена, часто сгибание ядер фибробласта, уменьшение или отсутствие митохондрий, дезорганизация ЭПР и их расширение, после вскрытия живота, широкое воспалительное отекание таза, пролиферация соединительной ткани, утолщение и укрепление маточных труб близко к матке, спайчивание маточных труб и яичников или эпителиальные кисты; в брюшной полости уровень IL-1β, IL-17 и TNF-α заметно увеличивался (P<0.01), средняя интенсивность флуоресценции MPO и H3 увеличивались (P<0.01), уровень экспрессии NE, H3, CD54, PI3K, Akt значительно повышался (P<0.01). По сравнению с модельной группой, в группе активатора mTOR под электронным микроскопом количество фибробластов значительно увеличивалось, частое сгибание ядер фибробласта, отсутствие митохондрий, расширение ЭПР и сильное увеличение коллагена; спайчиваниe таза, повреждение тканей матки, маточных труб и яичников усиливались; в брюшной полости уровень IL-1β, IL-17 и TNF-α заметно увеличивался (P<0.01), средняя интенсивность флуоресценции MPO и H3 увеличивались (P<0.01); в группах XYSKD и ингибитора mTOR количество фибробластов и коллагена уменьшалось, отсутствие митохондрий и расширение ЭПР улучшалось в разной степени; внешний вид матки, маточных труб и яичников улучшался в разной степени; в брюшной полости уровень IL-1β, IL-17 и TNF-α заметно уменьшался (P<0.01), средняя интенсивность флуоресценции MPO и H3 уменьшалась (P<0.01), уровень экспрессии NE, H3, CD54, PI3K, Akt значительно уменьшался (P<0.05, P<0.01). По сравнению с группой активатора mTOR, в группе активатора mTOR + XYSKD было улучшение патологической структуры тканей таза, уменьшение уровня IL-1β, IL-17 и TNF-α (P<0.01), средняя интенсивность флуоресценции MPO и H3 уменьшалась (P<0.01), уровень экспрессии NE, H3, CD54, α-SMA, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt значительно уменьшался (P<0.01), уровень экспрессии NE, H3, CD54, α-SMA, PI3K, Akt mRNA значительно уменьшался (P<0.01). По сравнению с группой ингибитора mTOR, в группе ингибитора mTOR + XYSKD степень патологии тканей таза уменьшалась, уровень IL-1β, IL-17 и TNF-α значительно уменьшался (P<0.01), средняя интенсивность флуоресценции MPO и H3 уменьшалась (P<0.01), уровень экспрессии NE, CD54 значительно уменьшался (P<0.05). Заключение: китайское лекарственное средство XYSKD способно подавлять излишнее формирование и выход из нейтрофильной экстрацеллюлярной ловушки через ингибирование PI3K/Akt/mTOR, улучшать воспалительную среду в тазовом пространстве, снижать степень спайчивания тканей таза, уменьшать пролиферацию фибробластов, тем самым оказывая терапевтическое воздействие на SPID. Его механизм возможно связан со снижением уровня IL-1β, IL-17, TNF-α в тазовом пространстве, снижением экспрессии NE, H3, CD54, α-SMA, PI3K, Akt в спайчевой ткани таза.

Xiaoyao Shukun decoction;sequelae of pelvic inflammatory disease;neutrophil extracellular traps;phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin （PI3K/Akt/mTOR） signaling pathway;fibrosis