Капсулы для ослабления ветра и отравления путем подавления пути TLR/NF-κB в эпителиальных клетках дыхательных путей для смягчения вирусной пневмонии

GENG Zihan ,  

BAO Lei ,  

CAO Shan ,  

ZHU Qiang ,  

PAN Jun ,  

LI Shuran ,  

ZHAO Ronghua ,  

SUN Jing ,  

BAO Yanyan ,  

MU Shaoqiu ,  

CUI Xiaolan ,  

GUO Shanshan ,  

摘要

Целью данного исследования является изучение возможного механизма капсул для лечения ветра и отравления (SFJD) в смягчении вирусной пневмонии типа A, вызванной вирусом гриппа H1N1, с акцентом на его влияние на сигнальные пути рецепторов типа тол-подобных (TLR) в эпителиальных клетках дыхательных путей. Мы разделили мышей на нормальную группу, группу с инфекцией PR8 и группу SFJD (8.4 г/кг) подкормки, каждая из 10 мышей. День инфекции был первым днем, а в группе SFJD каждую мышь кормили по 20 мл/кг ежедневно, в то время как группам нормальной и PR8 давали равный объем деионизированной воды. На пятый день проводилось микро-компьютерное компьютерное томографическое сканирование (микро-КТ), а затем срезали легкие мыши для расчета легочного индекса с целью проверки эффективности лекарства; анализ использовался одноклеточной последовательности для выявления дифференциальной экспрессии генов эпителиальных клеток дыхательных путей.; иммуногистохимическим методом (IHC) анализировали экспрессию белков рецепторов клеток EpCAM, связанных с факторами 6 (TRAF6) и метадезоксидирование (MyD88), расчет доли эпителиальных клеток дыхательных путей, выражающих белок пути TLR; методом изоляции клеток дыхательных путей; методом иммунного окрашивания белка (Western blot) анализировали выражение белков рецепторов клеток EpCAM, TRAF6, IKKα и NF-&κβ; обнаружили уровни интерлейкина-1β (IL-1β) и фактора некроза опухоли-α (TNF-α) в легочной ткани методом ферментно-связанного иммунного сорбента (ELISA). На транскриптомной уровне SFJD способен инвертировать тренд экспрессии генов пути сигнала TLR в эпителиальных клетках дыхательных путей, снижая множество связанных с путем TLR генов экспрессии, <italic>P>0.01. На белковом уровне, SFJD существенно снизил долю эпителиальных клеток, выражающихся TLR3 в легочных тканях, <italic>P>0.05, значительно снижал уровень экспрессии TLR2, TLR3, TLR4, TRIF, TRAF6, IKKα и NF-κB клеток, <italic>P>0.05, <italic>P>0.01, а также уровни противовоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α в легочной ткани, <italic>P>0.01. Выводы SFJD способен подавлять рецептор TLR и последовательную реакцию регуляции в эпителиальных клетках дыхательных путей, возможно, один из механизмов его смягчения вирусных пневмоний.

关键词

Капсулы для ослабления ветра и отравления; вирус гриппа H1N1 типа A; эпителиальные клетки дыхательных путей; сигнальные пути TLR

阅读全文