Исследование механизма действия травяного экстракта в лечении почечной болезни, вызванной сахарным диабетом, с использованием технологии массовой спектрометрии с метками тандемного типа (TMT)

LI Lingyi ,  

YU Jiaxiang ,  

ZHANG Hanwen ,  

SHI Yan ,  

WANG Yilin ,  

WU Yi ,  

CHENG Yuefeng ,  

ZHENG Guangxin ,  

ZHANG Wenshun ,  

摘要

Целью данного исследования является наблюдение за эффективностью травяного экстракта в лечении почечной болезни, вызванной сахарным диабетом (DKD), и изучение его механизма действия. Были выбраны 45 мужских мышей SPF db/db в возрасте 16 недель, которые были случайным образом разделены на модельную группу и другие группы с высоким, средним и низким дозировками травяного экстракта (57,850, 28,925, 14,463 г / кг / сут), а также группу ненеокленов, в которую было взято 9 других мышей db/m, чтобы они были пустой группой. Каждая лечебная группа была кормленами соответствующей дозой в течение 8 недель перед процедурой взятия проб. Результаты анализов мочи, сыворотки, тканей печени, поджелудочной железы и почек каждой лечебной группы были использованы для оценки модели DKD и эффективности травяного экстракта, с применением технологии массовой спектрометрии с метками тандемного типа (TMT) для определения возможных механизмов действия, и были выбраны специфические белки связанные с мембраной связанной с лизосомой 2A (LAMP2A), легкой цепью микротрубочного белка 3 Ⅱ (LC3 Ⅱ) и белком домена теплового белка NOD-подобный рецессивный белок 3 (NLRP3) для иммуннофлуоресцентного анализа для проверки результатов массовой спектрометрии с метками тандемного типа (TMT). В сравнении с пустой группой, значительно увеличилось значение отношения белка альбумин / креатинина мочи (UACR), белок нейтрофиловой желе-нной липидосвязывающий белок (NGAL), сывороточный NGAL, сывороточный креатинин (Cre-s), мочевая кислота (UA) и содержание мочевины (UREA) в модельной группе, присутствовали явные патологические изменения в почках, сходные с DKD, что говорит о хорошей модели DKD. После вмешательства травяного экстракта, названные показатели и патологические изменения значительно улучшились. Используя технологию массовой спектрометрии с метками тандемного типа (TMT), наши выборы показали, что экстракт работает путем регуляции автофагии, синтеза аминокислот-tRNA, метионина и цистеина. Результаты иммуннофлуоресцентного анализа, связанного с автофагическими белками, указывают на то, что по сравнению с пустой группой, количество белка LAMP2A и LC3 Ⅱ в модельной группе значительно снизилось, а количество белка NLRP3 значительно увеличилось (P <0,01), после вмешательства травяного экстракта, количество белка LAMP2A в каждой лечебной группе заметно увеличилось, количество белка LC3 Ⅱ в группах с высокой и средней дозировками травяного экстракта заметно увеличилось, и количество белка NLRP3 в каждой группе лечебных препаратов заметно уменьшилось (P <0,01). Считается, что травяной экстракт может эффективно улучшить показатели сахара в крови, уменьшить белок в моче и замедлить прогрессирование почечной болезни, вызванной сахарным диабетом, и его действие связано с регуляцией автофагии, но точный механизм регуляции автофагии требует дальнейшего изучения.

关键词

Травяной экстракт; почечная болезнь, вызванная сахарным диабетом; технология массовой спектрометрии с метками тандемного типа (TMT); автофагия

阅读全文