Основанный на технике квантовой меткированной тандемной масс-спектрометрии исследование китайского комплексного препарата YTK в лечении почечной болезни сахарного диабета, его механизм действия
Целью исследования является изучение эффективности комплексного китайского препарата YTK в лечении почечной болезни сахарного диабета (DKD) и изучение его механизма действия. Было отобрано 45 мужских мышей db/db SPF в возрасте 16 недель, случайным образом разделенных на модельную группу, высокодозную, среднюю и низкую дозы YTK (57.850, 28.925, 14.463 г / кг -1 * д -1 ) и нитрола негруппу (0.002 6 г / кг -1 * д -1 ); также было выбрано 9 мышей db/m в качестве контрольной группы. Каждая терапевтическая группа была кормлена соответствующей дозой, и забор материала производился через 8 недель лечения. Результаты анализов мочи и плазмы у каждой группы, изменения в лейкемических тканях, поджелудочной железе и почках использовались для оценки модели DKD и оценки эффективности YTK, и использовалась техника квантовой протеомики с меченой тандемной масс-спектрометрией (TMT) для выявления возможного механизма ее действия, были выбраны связанные с лизосомами белок 2A (LAMP2A), связанный с микротрубками белок легкой цепи 3 Ⅱ (LC3 Ⅱ) и белок росткового домена инфекционного организма 3 (NLRP3) для проверки результатов TMT-протеомики. Иммунное флуоресцентное тестирование показало следующие результаты: в сравнении с контрольной группой у модельной группы отмечалось заметное увеличение коэффициента белка / креатинина в моче (UACR), лейкемического связывающего белка с нейтрофильным эндогенным липидом (NGAL), NGAL в плазме, креатинин в плазме (Cre-s), мочевая кислота (UA) и урея (UREA) ( P <0.01), наблюдались явные патологические изменения в почках, сходные с DKD, это хорошая модель DKD. После вмешательства YTK эти показатели и патологические изменения явно улучшились. Результаты TMT-протеомики показали, что YTK действует путем регулирования автономии, синтеза аминоацил-tRNA, метаболизма цистеина и метионина. Иммунное флуоресцентное тестирование показало следующее: в сравнении с контрольной группой, у модельной группы отмечается значительное снижение уровня экспрессии LAMP2A и LC3 Ⅱ, и значительное увеличение уровня экспрессии NLRP3 ( P italic><0.01), после вмешательства YTK уровень экспрессии LAMP2A для всех групп лечения значительно увеличился, уровень экспрессии LC3 Ⅱ для высокодозной и средней групп YTK заметно увеличился, уровень экспрессии NLRP3 для всех групп лечения заметно снизился ( P italic><0.01). YTK способен эффективно улучшать гликемические показатели в крови, снижать белковые мочи, замедлять прогрессирование DKD, ее действие связано с регулированием автономии, но конкретный механизм регулирования автономии требует дальнейшего исследования.
关键词
YTK, DKD, техника квантовой протеомики с меченой тандемной масс-спектрометрией (TMT)