Исследование действия капсулы для сердца и мозга на механизм сокращения периферических клеток в ишемическом повреждении мозга у крыс, опосредуемое путем RHOA/ROCK1
Целью данного исследования является изучение механизма действия капсулы для сердца и мозга на ишемическое повреждение мозга у крыс, сопровождаемое изменением периферических клеток, через путь сигнализации Рас семейства A (RHOA) / рок-ассоциированный серин/треониновый белок киназы 1 (ROCK1). Методы. 90 крыс были случайным образом разделены на группы: шампань, модель, экстракт женьшеня гинкго билоба (21,6 мг·кг-1), низкая, средняя и высокая доза капсул для сердца и мозга (55, 110, 220 мг·кг-1), по 15 в каждой группе. Кроме шампуня только модельная группа была подвергнута временной блокаде средней мозговой артерии (tMCAO). Оценивалась нейрофункция с помощью оценки нейрофункции, поток крови в мозг с помощью лазерной рассеянной структуры кровеносных сосудов, вычисление инфарктной зоны головного мозга с помощью окрашивания тетразолия (TTC), исследование патологических изменений головного мозга с помощью гематоксилина-эозина (ГЭ) окрашивания и окрашивания по Нисслю, исследование морфологии периферических клеток с помощью трансмиссионной электронной микроскопии, проверка состояния кровеносного барьера с помощью окрашивания Иванова, регистрация уровня альбумина и модифицированного альбумина, определение уровня мРНК и экспрессии белка RHOA, ROCK1, рецептора тромбоцита-производного ростового фактора β (PDGFRB), α-гладкомышечного актинового белка (α-SMA), белка тесных соединений (ZO-1), металлопротеиназы-2 (MMP-2), металлопротеиназы-9 (MMP-9), используя реально-временную полимеразную цепную реакцию (Real-time PCR) и иммуноблотирование (Western blot). Результаты. По сравнению с шампаньной группой, у крыс из модельной группы оценка нейрофункции ухудшилась, процентное уменьшение кровотока в головной мозг, увеличение зоны инфаркта головного мозга (P<0,01), ядра корковых нейронов уменьшились, проявления отека, уменьшение количества ниссовых тел, уменьшение площади перинейры, увеличение содержания альбумина в коре (P<0,05), повышение уровня модифицированного альбумина (P<0,01), относительное увеличение уровня экспрессии мРНК и белка RHOA, ROCK1, PDGFRB, α-SMA, MMP-2, MMP-9 (P<0,01), снижение уровня экспрессии ZO-1. По сравнению с модельной группой, у крыс в группах, получавших препараты, наблюдалось улучшение оценки нейрофункции, уменьшение процентного уменьшения кровотока в головной мозг, уменьшение зоны инфаркта головного мозга (P<0,01), уменьшение патологических изменений корового желудка, увеличение количества ниссовых тел, увеличение площади перинейры, уменьшение содержания альбумина в коре, снижение уровня модифицированного альбумина (P<0,01), снижение относительного уровня экспрессии мРНК и белка RHOA, ROCK1, PDGFRB, α-SMA, MMP-2, MMP-9 (P<0,01), увеличение уровня экспрессии ZO-1. В частности, средняя доза капсулы для сердца и мозга оказала наиболее выраженное улучшающее действие на ишемическое повреждение мозга. Выводы. Капсулы для сердца и мозга способны восстановить кровоснабжение мозга при ишемическом повреждении у крыс, уменьшить нарушения микроциркуляции, защитить кровеносный барьер. Их механизм действия, возможно, связан с подавлением сигнального пути RHOA/ROCK1 и уменьшением связанных с ишемией сокращения периферических клеток.
关键词
Капсулы для сердца и мозга; ишемическое повреждение мозга; сокращение периферических клеток; семейство Рас A (RHOA) / рок-ассоциированный серин/треониновый белок киназы 1 (ROCK1) путь; фармакологический механизм