Цель исследования состояла в изучении влияния сыворотки, содержащей нутриенты для почек и сосудов, на клетки стопы крыс, вызванные липополисахаридами (LPS), и изучении потенциального механизма действия. Метод В сердце и наружные поверхности стопы крыс SD готовят пустую сыворотку, сыворотку с лекартственным веществом, включая низкую, среднюю и высокую дозу TLBS; в клеточной культуре клетки стопы крыс, клеточный рост и активность (CKK-8) используется для проверки воздействия лекарственной сыворотки на активность клеток стопы, определения наилучшего объёма сыворотки для вмешательства и оптимальной концентрации LPS, вызывающей повреждение клеток стопы; клетки разделяют на контрольную группу (НC-10% пустой сыворотки), модельную группу (МС-20,00 мг·л^-1 LPS+10% пустой сыворотки), группу с лекарственным веществом (LP-20,00 мг·л^-1 LPS+10% сыворотки с лекарственным веществом), группы с низкой дозой TLBS (TLBS-L-20,00 мг·л^-1 LPS+10% сыворотки с низкой дозой TLBS), средней дозой TLBS (TLBS-M-20,00 мг·л^-1 LPS+10% сыворотки с средней дозой TLBS) и с высокой дозой TLBS (TLBS-H-20,00 мг·л^-1 LPS+10% сыворотки с высокой дозой TLBS) на 48 ч. С помощью компьютерного микроскопа изучают структуру клеток стопы; применяют тест TUNEL для определения апоптоза клеток стопы; используют иммунофлюоресцентное исследование для определения флуоресценции N-конечной области белка GSDMD-NT (иммунный метод определения белка) в клетках стопы; с помощью методов реального времени полимеразной цепной реакции (Real-time PCR) и методом иммунного анализа белков (Western blot) определяют экспрессию G-протеин-связывающего рецептора клеток стопы семейства C (GPRC5B), ядерного фактора-κB (NF-κB) p50, NF-κB p52, NF-κB p65, Rel B, c-Rel, рецептора NLRP3, каплеобразующего белка-1 (Caspase-1), GSDMD-NT, белков интерлейкина-1β (IL-1β), IL-18, мембранных белков (Nephrin), интегринов α3 и интегринов β1 мРНК и экспрессии белков. Результат По сравнению с контрольной группой, группа модели (МС) стопы крыс имеют значительное уменьшение выступа, отсутствие жгутов клеточной мембраны, уменьшение органелл, увеличение и отек митохондрий, неравномерность в ядрах, слабость краски хромосом; TUNEL-положительные клетки имеют заметное количество (P<0,01); интенсивность флуоресценции GSDMD-NT заметно увеличивается; Экспрессия генов GPRC5B, NF-κB p50, NF-κB p52, NF-κB p65, Rel B, c-Rel, NLRP3, Caspase-1, GSDMD-NT, IL-1β, IL-18 (мРНК и белка) значительно возрастает (P<0,01), а выражение генов и белков Nephrin, α3 и β1 интегринов явно уменьшается (P<0,05, P<0,01). По сравнению с модельной группой (МС), группы LP, TLBS-M, TLBS-H имеют изменения в структуре клеток стопы в разной степени, увеличение и выражение выступа, целостность клеточной мембраны, уменьшение органелл, уменьшение отека митохондрий; TUNEL-положительные клетки заметно уменьшаются (P<0,01); интенсивность флуоресценции GSDMD-NT немного снижается; Экспрессия генов GPRC5B, NF-κB p50, NF-κB p52, NF-κB p65, Rel B, c-Rel, NLRP3, Caspase-1, GSDMD-NT, IL-1β, IL-18 (мРНК и белка) снижается (P<0,01), а выражение генов и белков Nephrin, α3 и β1 интегринов увеличивается незначительно- все эти изменения являются наиболее заметными в группе с высокой дозой TLBS. Вывод Сыворотка с медицинскими нутриентами TLBS способна улучшить повреждение стопы крыс, вызванное ЛПС, и её механизм, вероятно, связан с регулированием пути GPRC5B/NF-κB/NLRP3 для подавления апоптоза клеток.

Сыворотка с нутриентами для почек и сосудов; ИгА-нефропатия; клетки стопы; апоптоз клеток