Регуляция нейротрофического сигнального пути BDNF/TrkB лобной коры крысы и нейромедиаторов моноаминового типа комбинированным применением чахушугансана и асарона на моделируемых крысах CUMS

LI Yuexin ,  

ZHANG Zhijing ,  

GUO Ziyi ,  

YAN Di ,  

HU Xueyan ,  

YAO Jianping ,  

摘要

Цель исследования состояла в изучении антидепрессивного действия комбинированного применения чахушугансана и асарона на модели хронического непредсказуемого стресса (CUMS) у крыс и изучении механизма его действия с точки зрения морфологии ткани лобных долей, экспрессии ключевых молекул сигнального пути нейротрофического фактора мозга (BDNF) / рецептора тирозинкиназы (TrkB) и изменения нейромедиаторов моноаминового типа. Методы: 60 взрослых самцовых крыс SD были случайным образом разделены на 6 групп: нормальная группа, группа модели депрессии, группа чахушугансана, группа асарона, комбинированная группа чахушугансана и асарона, группа флуоксетина, каждая группа на 10 животных. Кроме нормальной группы, каждый день случайно проводилось 1-й тип легкого CUMS, включая 24-часовое голодание без запрета на питье, 24-часовое запрета на питье без запрета на еду, заливание влажных подстилок в клетке, фиксация на 3 часа, захват хвоста на 1 минуту, плавание в ледяной воде при 4°C, инверсия дня и ночи, всего 7 типов стресса, каждый метод стресса использовался 1-3 раза, в течение 21 дня. При наличии стресса крысам из различных групп подавали по желудку чахушугансан 3.3 г·кг-1·д-1, асарон 50 мг·кг-1·д-1, чахушугансан 3.3 г·кг-1·д-1 в сочетании с асароном 50 мг·кг-1·д-1, флуоксетин 2.1 мг·кг-1·д-1; крысам нормальной группы и группы модели депрессии подавали по желудку равное объему физиологического раствора. Перед и после моделирования проводили открытое поле, предпочтение сахарной воде и принудительное плавание. Крысам в реанимированном состоянии проводилось внутрибрюшное введение 3% натрия пентобарбитал, выделение лобной коры на льду. Оценка экспресии мРНК BDNF, TrkB и элементов CREB мРНК в лобных доляхощей крысы проводилась с помощью реальной полимеразной цепной реакции с использованием флуоресцентной метки (Real-time PCR), контроль экспресии BDNF, TrkB и CREB в передней коре мозга проводились методом иммуноблотирования (Western blot), контроль уровня содержания 5-гидрокситриптофана (5-HT), допамина (DA) и норадреналина (NE) в лобных долях головного мозга выполнен методом связывания иммуноферментным анализом (ELISA), а также произведена микроскопическая оценка морфологии лобной коры крысы. Результаты: По сравнению с нормальной группой, у крыс модели группы депрессии наблюдалось значительное снижение массы тела (P<0.05, P<0.01); оценка времени в открытом поле, вертикальных оценок и предпочтения к сахарной воде значительно снижается (P<0.01), время бессознательного плавания значительно увеличивается (P<0.01); нейроны лобной коры явно уменьшаются, количество мертвых клеток увеличивается, окраска клеток становится более интенсивной; мРНК BDNF, TrkB и CREB, уровень белка мРНК в лобной коре головного мозга, а также содержание 5-HT, NE, DA значительно снижается (P<0.01). По сравнению с модельной группой депрессии, общее состояние крыс в группах интервенции значительно улучшается; масса тела значительно увеличивается (P<0.05), оценка в открытом поле значительно повышается (P<0.05), время бессознательного плавания значительно сокращается (P<0.01); количество нейронов в лобной коре увеличивается, количество мертвых клеток сокращается, окраска клеток становится немного светлее; уровень экспресии мРНК BDNF, TrkB, CREB и уровень экспрессии белка в лобной коре увеличивается, а также уровень 5-HT, DA и NE значительно повышается (P<0.01). У крыс совместной группы чахушугансана и асарона после моделирования масса тела увеличивается, увеличение содержания 5-HT в головном мозге лобных долей крысы лучше, чем при применении чахушугансана, асарона (P<0.05), вертикальные оценки, повышение экспрессии мРНК BDNF в лобной коре увеличивается (P<0.05), время бессознательного плавания сокращается, увеличение экспрессии мРНК и BDNF, TrkB, CREB в лобной коре головного мозга и повышение содержания DA в лобных долях лучше, чем при использовании асарона (P<0.05). Вывод: Комбинированное применение чахушугансана и асарона может проявлять свое антидепрессивное действие на моделируемых крысах CUMS путем регулирования нейротрофического сигнального пути BDNF/TrkB лобной коры крысы и содержания нейромедиаторов моноаминового типа, и оно проявляет более значительное антидепрессивное действие, чем применение только чахушугансана и асарона.

关键词

чахушугансан; асарон; депрессия; нейротрофический фактор мозга/рецептор тирозинкиназы (BDNF/TrkB) сигнальный путь; моноаминовые нейромедиаторы

阅读全文