Цель исследования заключается в изучении влияния сыворотки капсул от желчи на чистые ядерные клетки периферической крови (PBMCs) и фибро-подобные синовиальные клетки (FLSs) пациентов с анкилозирующим спондилитом (AS), после совместного культивирования клеток на циркулярный РНК_0001543 / фактор транскрипции ядра (NF) -κB. Методы извлечения венозной крови у больных AS, выделение и извлечение PBMCs; совмещать FLSs с PBMCs больных AS, после совместной культивации собрать FLSs для последующего эксперимента. Норма для нормальных FLSs, модель для культивации клеток AS PBMCs и FLSs, капсулы от желчи для совместного культивирования добавляют к сыворотке капсул от желчи (6,48 г / кг). Исследование влияния сыворотки HQC на живучесть совместно выращиваемых клеток, эксперименты разделены на белую группу, группы 10% HQC, 20% HQC, 30% HQC. Исследование воздействия наилучшего концентрация сыворотки на факторы клеточного, путевые показатели, эксперименты разделены на группу нормальных, группу модели, группу сыворотки оптимальной концентрации. Вмешивание эффективности плазмидная трансфекция CircRNA_0001543, эксперимент разделен на белую группу, группу si-NC (добавление трансфекционного реагента), группу si-circ_0001543-1 (добавление трансфекционного реагента и вмешательство в трансфекцию circ_0001543 плазмидой 1), группу si-circ_0001543-2 (добавление трансфекционного реагента и вмешательство в трансфекцию circ_0001543 плазмидой 2), группу si-circ_0001543-3 (добавление трансфекционного реагента и вмешательство в трансфекцию circ_0001543 плазмидой 3). Передавая избыток плазмиды CircRNA_0001543, эксперимент разделен на белую группу, группу OE-NC (добавление трансфекционного реагента), группу OE-circ_0001543 (добавление трансфекционного реагента и передача плазмиды с избытком circ_0001543). Исследование воздействия вмешательства / избытка CircRNA_0001543 на факторы клеточного, путевые показатели, эксперимент разделен на группу si-NC, группу si-CircRNA_0001543, группу OE-NC, группу OECircRNA_0001543. Методом ферментов-связывающего иммуносорбентного анализа (ELISA) определяем уровень интерлейкина (IL)-1β, IL-10, IL-37 и экспрессию фактора некроза опухоли-α (TNF-α); методом реального времени полимеразной цепной реакции обнаруживаем экспрессию генов, связанных с CircRNA_0001543, IκBα и NF-κB p65. Результаты показали, что к 48-м часам 30% сыворотки капсул от желчи имеет значительное подавление пролиферации совместно выращенных клеток AS PBMCs и FLSs, является наилучшей концентрацией сыворотки для последующего эксперимента. По сравнению с нормальной группой, в модельной группе экспрессия NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α значительно повышена (Р<0,01), экспрессия CircRNA_0001543 mRNA, IL-10, IL-37 значительно снижена (Р<0,01). По сравнению с модельной группой, в группе сыворотки капсул от желчи значительно снижена экспрессия NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α (Р<0,05), экспрессия CircRNA_0001543 mRNA, IL-10, IL-37 значительно повышена (Р<0,05); причем самая выраженная разница была в группе с 30% сыворотки (Р<0,01). По сравнению с группой si-NC, экспрессия CircRNA_0001543 в группе si-CircRNA_0001543-3 значительно снижена (Р<0,01); по сравнению с группой OE-NC, экспрессия CircRNA_0001543 в группе OE-CircRNA_0001543 значительно повышена (Р<0,01), что свидетельствует о том, что трансфекция мешающей CircRNA_0001543, плазмиды успешна. На основе оптимальной концентрации сыворотки капсул от желчи после вмешательства si-CircRNA_0001543, экспрессия NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α значительно повышена (Р<0,01), экспрессия IL-10, IL-37 значительно снижена (Р<0,01); после вмешательства OE-CircRNA_0001543, экспрессия NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α значительно снижена (Р<0,01), экспрессия IL-10, IL-37 значительно повышена (Р<0,01). Выводы. Сыворотка капсул от желчи может через повышение экспрессии CircRNA_0001543, регулировать путь NF-κB, подавлять воспалительные факторы, повышать экспрессию антивоспалительных факторов, тем самым улучшать иммунно-воспалительные процессы AS.

Huangqin Qingre Chubi capsules;ankylosing spondylitis;peripheral blood mononuclear cell;human fibroblast-like synoviocyte;CircRNA_0001543/nuclear factor-kappa B （NF-κB）