Целью настоящего исследования является изучение механизма синергетического воздействия трехокиси мышьяка (ATO) в сочетании с его метаболитом диметиларсенином (DMAV) на индукцию апоптоза у клеток NB4 - лейкемии острой промиелоцитарной. Методы: Крысам вводили равные дозы стерильного физиологического раствора, ATO (1,6 мг/кг), DMAV (4,8,16,32 мг/кг) в сочетании с ATO (1,6 мг/кг) для получения соответствующей серумной терапии; клеточное пролиферативное и активное тестирование-8 (CCK-8) использовалось для оценки влияния серумной терапии на клеточную пролиферацию у клеток NB4; потоковая цитометрия, окрашивание двойным методом аннексина-V-FITC/пропидия (PI) использовалось для оценки клеточной апоптоза; использование флуоресцентного зонда DCFH-DA для анализа накопления реактивного кислорода внутри клетки; использование флуоресцентного зонда JC-1 для анализа изменения потенциала митохондриальной мембраны (Δψm); иммуноблотирование (Western blot) использовалось для оценки изменений в экспрессии апоптоз-ассоциированных белков Bcl-2-ассоциированный X-белок (Bax)/Bcl-2, цитохром С, разрезанный капсаз-9 и разрезанный капсаз-3, а также уровня фосфорилирования JNK. Результаты: 1) Совместное применение двух лекарств приводит к более высокой степени ингибирования пролиферации и большему количеству апоптоза по сравнению с одиночным применением ATO. 2) Совместное применение двух лекарств значительно увеличивает уровень накопления реактивного кислорода. 3) Совместное применение двух лекарств значительно снижает Δψm по сравнению с одиночным применением. 4) Совместное применение двух лекарств значительно усиливает высвобождение цитохрома С, значительно снижает уровень экспрессии Bcl-2, усиливает выражение Bax, разрезанный капсаз-3 и разрезанный капсаз-9. 5) Совместное применение двух лекарств значительно увеличивает уровень фосфорилирования JNK по сравнению с одиночным применением. Вывод: Сочетание DMAV и ATO вероятно индуцирует апоптоз путем синергетического реактивного кислорода, вызванного окислительным стрессом, распада Δψm, высвобождения цитохрома С, активации каспаз-9/каспаз-3 и уровня фосфорилирования JNK, регулирования семейства Bcl-2-ассоциированных белков (Bax/Bcl-2), стимулирующих апоптоз клеток NB4.

Диметиларсенин; Трехокись мышьяка; Окислительный стресс; Митохондриальный апоптоз