Целью исследования было изучить молекулярные механизмы прямой привязки новой зеленой кислоты (NA) к целевому белку и улучшение пролиферации клеток образования рогового слоя кожи, пораженной псориазом, и воспалительной реакции. В качестве модели клеток образования рогового слоя кожи, пораженной псориазом, использовались HaCaT M5, индуцированные M5. Сначала была проведена оценка жизнеспособности клеток синтезированной зонда NA (NA-P) и исходного препарата NA с использованием набора реактивов CCK-8 для оценки клеточной активности. В безопасной дозе была проведена оценка эффективности NA и NA-P с использованием реактивов CCK-8 для изучения влияния 0~100 мкмоль/л NA и зондов на клеточное распространение индуцированных M5 клеток HaCaT, а также использовались ферментативный иммуносвязанный анализ (ELISA) для изучения влияния 20, 40, 80 мкмоль/л NA и 80 мкмоль/л NA-зонда на экспрессию воспалительных факторов в клетках HaCaT, таких как фактор некроза опухоли-α (TNF-α), интерлейкина (IL)-1β, IL-23, IL-17A, а также методом количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени (Real-time PCR) для изучения влияния NA на экспрессию генов К16, S100A9, S100A7, IL-6, IL-17A, фактора хемотаксиса 1 (CXCL1) в клетках HaCaT. Была проведена маркировка клеток в инкубаторе с использованием зонда NA и конкурентных экспериментов, а также проведен сравнительный анализ с помощью метода химического анализа и масс-спектрометрии (Pull-down/LC-MS/MS) для идентификации и анализа целевых белков, проведены эксперименты по Pull down-WB, целенаправленному анализу теплового переноса в клетках с помощью экспериментального анализа белков и молекулярного докинга для проверки целевых точек. Наконец, с использованием метода Real-time PCR было изучено влияние NA на экспрессию мРНК IL-1β, ядерного инфлюамазомного домена подобной рецепторной белок 3 (NLRP3), апоптоз-ассоциированный спот-подобный белок (ASC), каспаз-1 в клетках HaCaT при концентрациях 20, 40, 80 мкмоль/л NA и 80 мкмоль/л NA-зонда; проведен анализ иммуноблотирования белков (Western blot) для изучения влияния NA на экспрессию фосфорилированного p65 (p-p65), p65, фосфорилированного ингибитора α-нф-κB (p-IκBα), ингибитора α-нф-κB (IκBα), теплового шока А90 (HSP90). В результа�

neochlorogenic acid;HSP90;nuclear factor-κB/nucleotide-binding oligomeric structural domain-like receptor protein 3（NF-κB/NLRP3） signaling pathway;proliferation of psoriatic keratinocyte;inflammation