предыдущий|следующий

Новокислородная кислота через регулирование HSP90 улучшает пролиферацию клеток эпидермиса в псориазе и воспалительную реакцию NF-κB/NLRP3

  • role： First author第一作者
  • Affiliation：

    Guang'anmen Hospital， China Academy of Chinese Medicine， Beijing 100053， China

    Artemisinin Center， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China

  • Email：434839638@qq.com
  • Introduction：江梦瑶，在读博士，执业医师，从事中医药防治皮肤病的机制研究，E-mail：434839638@qq.com
JIANG Mengyao12,  
  • Affiliation：

    Artemisinin Center， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China

ZHANG Xinwei2,  
  • role： Corresponding author通信作者
  • Affiliation：

    Xiyuan Hospital， China Academy of Chinese Medicine， Beijing 100091， China

  • Email：bean5@126.com
  • Introduction：杨斌，硕士，副研究员，主要从事中药药理学研究，E-mail：bean5@126.com
YANG Bin3*,  
  • role： Corresponding author通信作者
  • Affiliation：

    Guang'anmen Hospital， China Academy of Chinese Medicine， Beijing 100053， China

    Xiyuan Hospital， China Academy of Chinese Medicine， Beijing 100091， China

  • Email：songping@vip.126.com
  • Introduction：宋坪，博士，主任医师，从事中西医结合防治皮肤病研究，E-mail：songping@vip.126.com；
SONG Ping13*

реферат

Цель исследования заключается в определении целевого белка, напрямую связанного с новокислородной кислотой (NA), и его молекулярных механизмах улучшения пролиферации клеток эпидермиса в псориазе и воспалительной реакции. В качестве модели клеточной пролиферации в эпидермисе при псориазе и воспалительной реакции использовались клетки HaCaT, индуцированные M5. Сначала использовали тесты на жизнеспособность клеток CCK-8 для оценки активности синтетического зонда новокислородной кислоты (NA-P) и исходной NA на клеточной активности. Оценили эффективность NA и NA-P в безопасном диапазоне концентраций, использовали тест CCK-8 для определения влияния концентраций NA и зонда на пролиферацию клеток HaCaT, индуцированных M5, и использовали тест ELISA для определения влияния концентраций 20, 40, 80 мкмол•л-1 NA и 80 мкмол•л-1 NA-P на экспрессию воспалительных факторов, таких как TNF-α, интерлейкины (IL)-1β, IL-23, IL-17A, использовали Real-time PCR для определения влияния NA на экспрессию мРНК кератин 16 (K16), кальциевого связывающего белка S100A9 (S100A9), кальциевого связывающего белка S100A7 (S100A7), IL-6, IL-17A и хемотаксического фактора CXCL1 в клетках HaCaT. Использовали NA-P для мечение живых клеток в пробирках и соревновательный экспериментирование, а также использовали метод Pull-down/LC-MS/MS для ловли и анализа целевых белков. Использовали Pull down-WB, WB/CETSA и молекулярное докирование для верификации целей. Наконец, использовали Real-time PCR для определения влияния концентраций 20, 40, 80 μmol•л-1 NA и 80 μmol•л-1 NA-P на экспрессию мРНК IL-1β, NLRP3 и ASC, Caspase-1 в клетках HaCaT, и использовали WB для определения влияния экспрессии белков, таких как p-p65 и p65, p-IκBα и IκBα, HSP90. В результате было выявлено, что в безопасном диапазоне концентраций 200 μmol•л-1 M5 увеличивала пролиферацию клеток HaCaT, а также увеличение экспрессии воспалительных факторов, таких как TNF-α, IL-1β, IL-23, IL-17A, увеличение экспрессии K16, S100A9, S100A7, IL-6, IL-17A, CXCL1. По сравнению с контрольной группой, NA и NA-P тормозили пролиферацию клеток в группах концентраций NA-L, NA-M, NA-H и NA-P-H (группы NA-L, NA-M, NA-H и NA-P-H), и уменьшали экспрессию воспалительных факторов, таких как TNF-α, IL-1β, IL-23, IL-17A, уменьшали экспрессию K16, S100A9, S100A7, IL-6, IL-17A, CXCL1 (P <0,05). Конкурентные исследования с NA-P с концентрациями 200 μmol•л-1 NA и 100 μmol•л-1 NA-P показали высокую вероятность HSP90. По сравнению с контрольной группой, M5 увеличивала экспрессию мРНК для NLRP3, IL-1β, ASC, Caspase-1, коэффициент p-p65/p65, p-IκBα/IκBα, и увеличивала экспрессию HSP90 (P <0,05); по сравнению с M5, в группах NA-L, NA-M, NA-H, NA-P-H уменьшалась экспрессия мРНК для NLRP3, IL-1β, ASC, Caspase-1 (P <0,05); в группах NA-M, NA-H уменьшался коэффициент p-p65/p65, p-IκBα/IκBα (P <0,05), а изменения HSP90 были незначительными. WB поставил под сомнение NA напрямую нацеливает HSP90, и связывание NA с HSP90 может повысить его теплостойкость, и связывание NA с членами семейства HSP90AA1 и HSP90B1 и HSP90AB1 выполняется стабильно. Вывод: NA может уменьшить пролиферацию клеток эпидермиса в псориазе и воспалительную реакцию, и, возможно, это происходит через регулирование сигнального пути NF-κB/NLRP3 при помощи HSP90.

ключеви́че слова́

Новокислородная кислота; тепловой белок 90 (HSP90); NF-κB/NLRP3 сигнальный путь; пролиферация клеток эпидермиса в псориазе; воспаление

References

  1. 1.
    BOEHNCKE W H， SCHÖN M P. Psoriasis ［J］. Lancet， 2015， 386（9997）： 983-994.
  2. 2.
    GHORESCHI K， BALATO A， ENERBÄCK C， et al. Therapeutics targeting the IL-23 and IL-17 pathway in psoriasis ［J］. Lancet， 2021， 397（10275）： 754-766.
  3. 3.
    LV J， ZHOU D， WANG Y， et al. Effects of luteolin on treatment of psoriasis by repressing HSP90 ［J］. Int Immunopharmacol， 2020， 79： 106070.
  4. 4.
    HUANG P， HU F， YANG Z B， et al. Matrine regulates Th1/Th2 inflammatory responses by inhibiting the Hsp90/NF-κB signaling axis to alleviate atopic dermatitis ［J］. Kaohsiung J Med Sci， 2023， 39（5）： 501-510.
  5. 5.
    NAIR R P， DUFFIN K C， HELMS C， et al. Genome-wide scan reveals association of psoriasis with IL-23 and NF-kappaB pathways ［J］. Nat Genet， 2009， 41（2）： 199-204.
  6. 6.
    DALGARD F J， GIELER U， TOMAS-ARAGONES L， et al. The psychological burden of skin diseases： A cross-sectional multicenter study among dermatological out-patients in 13 European countries ［J］. J Invest Dermatol， 2015， 135（4）： 984-91.
  7. 7.
    SONG P， WU Z K， ZOU Y H， et al. Exploration of new ideas of psoriasis treatment and Kaixuan detoxification in traditional Chinese medicine［J］.Chin J Inf Tradit Chin Med， 2009， 16（12）： 90-91.
  8. 8.
    DAI D， CHEN Y H， HE C Y， et al. Exploring the intervention mechanism of Kaixuan kidney tonic method on psoriasis vulgaris based on targeted lipidomics［J］.Chin J Exp Tradit Med Form， 2023， 29（4）： 117-125.
  9. 9.
    WANG X X， FANG S P， YANG M Y， et al. Dynamic changes of tumor necrosis factor-alpha， interleukin-8， and substance P content in plaque-type psoriasis lesions intervened by the Kaixuan detoxification method［J］.Chin J Dermatovenerol Integr Tradit West Med， 2014， 13（3）： 145-148.
  10. 10.
    QIN Y P， DAI D， XIAO X， et al. Kaixuan detoxification formula improves imiquimod-induced skin lesion symptoms in psoriasis-like mice by regulating S1P levels［J］.J Jiangsu Univ：Med Ed， 2023， 33（2）： 118-125.
  11. 11.
    KIM M， CHOI S Y， LEE P， et al. Neochlorogenic acid inhibits lipopolysaccharide-induced activation and pro-inflammatory responses in BV2 microglial cells ［J］. Neurochem Res， 2015， 40（9）： 1792-1798.
  12. 12.
    PARK S Y， JIN M L， YI E H， et al. Neochlorogenic acid inhibits against LPS-activated inflammatory responses through up-regulation of Nrf2/HO-1 and involving AMPK pathway ［J］. Environ Toxicol Pharmacol， 2018， 62： 1-10.
  13. 13.
    GAO X H， ZHANG S D， WANG L T， et al. Anti-inflammatory effects of neochlorogenic acid extract from Mulberry Leaf （Morus alba L.） against LPS-stimulated inflammatory response through mediating the AMPK/Nrf2 signaling pathway in A549 cells ［J］. Molecules， 2020，doi：.
  14. 14.
    ZHUANG P， XIE L， ZHANG Y， et al. Inhibition of desmoglein-1 by aspirin leads to synthetic lethality of keratinocytes in Shuanghuanglian-induced cutaneous eruption response ［J］. Toxicol Lett， 2021， 349： 145-154.
  15. 15.
    AHN H S， KIM H J， NA C， et al. The protective effect of Adenocaulon himalaicum Edgew. and its bioactive compound neochlorogenic acid against UVB-induced skin damage in human dermal fibroblasts and epidermal keratinocytes ［J］. Plants （Basel）， 2021， 10（8）：1669.
  16. 16.
    YANG T Y， WU Y L， YU M H， et al. Mulberry leaf and neochlorogenic acid alleviates glucolipotoxicity-induced oxidative stress and inhibits proliferation/migration via downregulating Ras and FAK signaling pathway in vascular smooth muscle cell ［J］. Nutrients， 2022， 14（15）：3006.
  17. 17.
    LI Y， YU X， DENG L， et al. Neochlorogenic acid anchors MCU-based calcium overload for cancer therapy ［J］. Food Funct， 2021， 12（22）： 11387-11398.
  18. 18.
    CHE J， ZHAO T， LIU W， et al. Neochlorogenic acid enhances the antitumor effects of pingyangmycin via regulating TOP2A ［J］. Mol Med Rep， 2021， doi：.
  19. 19.
    WANG C， CHEN N. Activity-based proteomic analysis［J］.Acta Chim Sinica， 2015， 73（7）： 657-668.
  20. 20.
    WANG P， LUO J， LI H Z， et al. Advances in chemical proteomics for the identification of targets of natural product action［J］.Nat Prod Res Dev， 2020， 32（1）： 144-152.
  21. 21.
    GAO J， CHEN F， FANG H， et al. Daphnetin inhibits proliferation and inflammatory response in human HaCaT keratinocytes and ameliorates imiquimod-induced psoriasis-like skin lesion in mice ［J］. Biol Res， 2020， 53（1）： 48.
  22. 22.
    RABEONY H， PETIT-PARIS I， GARNIER J， et al. Inhibition of keratinocyte differentiation by the synergistic effect of IL-17A， IL-22， IL-1α， TNFα and oncostatin M ［J］. PLoS One， 2014， 9（7）： e101937.
  23. 23.
    MORáN LUENGO T， MAYER M P， RÜDIGER S G D. The Hsp70-Hsp90 chaperone cascade in protein folding ［J］. Trends Cell Biol， 2019， 29（2）： 164-177.
  24. 24.
    CAI L， LI L， CHEN X， et al. Regulation of SKP2 protein stability by heat shock protein 90 chaperone machinery ［J］. Signal Transduct Target Ther， 2021， 6（1）： 276.
  25. 25.
    SIMA S， RICHTER K. Regulation of the Hsp90 system ［J］. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res， 2018， 1865（6）： 889-897.
  26. 26.
    LV C， QIAO X H， GAO J J， et al. The effect of comedones modulating the cGAS/STING signaling pathway on the inflammatory response in a cellular model of psoriasis［J］.Chin J Exp Tradit Med Form， 2024， 30（24）： 114-120.
  27. 27.
    NIZAMI S， ARUNASALAM K， GREEN J， et al. Inhibition of the NLRP3 inflammasome by HSP90 inhibitors ［J］. Immunology， 2021， 162（1）： 84-91.
  28. 28.
    MAYOR A， MARTINON F， DE SMEDT T， et al. A crucial function of SGT1 and HSP90 in inflammasome activity links mammalian and plant innate immune responses ［J］. Nat Immunol， 2007， 8（5）： 497-503.
  29. 29.
    ZHANG M， CUI J， SHEN F， et al. A novel mode of action for COX-2 inhibition： Targeting ATPase domain of HSP90 induces ubiquitin degradation of new client protein COX-2 ［J］. Clin Transl Med， 2022， 12（1）： e705.

Читать полностью

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website