Целью данного исследования было выяснить, как капсулы облепихи влияют на улучшение функциональной диспепсии (FD) и потенциальный механизм этого влияния. 60 новорожденных самцовых крыс SD уровня SPF (в возрасте 7 дней) были случайным образом разделены на нормальную группу, модельную группу, группы с низкой и высокой дозами капсул облепихи (0.135 и 0.54 г/кг) и группу мозапентина (3 мг/кг), по 12 крыс в каждой группе. За исключением нормальной группы, у крыс из всех групп была создана модель FD с использованием метода питания йода уксуса. В соответствующие группы крысы получали соответствующий лекарственный препарат, при этом крысы из нормальной группы и модельной группы получали перорально поваренную дистиллированную воду в эквивалентном объеме, 1 раз в день в течение 7 последовательных дней. Наблюдалось за общим состоянием крыс, а также измерялось количество выпиваемой воды и потребляемой пищи. По окончании лечения проводилось измерение скорости опорожнения желудка и скорости перемещения кишечника; для оценки патологических изменений двенадцатиперстной кишки использовалось окрашивание гематоксилином и эозином. Была использована иммунофлуоресцентная техника для изучения экспрессии белка облепихи в колоне (Occludin) и связвющего протеина-1 (ZO-1) у крыс. После последнего приема лекарств проводилось секвенирование транскриптомы, чтобы выявить различия в экспрессии генов у ткани двенадцатиперстной кишки у модельной группы по сравнению с нормальной группой и у группы с высокой дозой капсул облепихи по сравнению с модельной группой, а также анализ обогащения генов по онтологии генов (GO) и Генно-геномной энциклопедии Киото (KEGG). Были использованы метод химической иммуноблотной анализа, иммунофлуоресцентная техника и количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени для проверки результатов секвенирования транскриптомы и отбора активных компонентов капсул облепихи и ключевых целевых белков. По сравнению с нормальной группой, общее состояние крыс из модельной группы было хуже, показатели потребления воды и пищи, а также скорость опорожнения желудка и скорость перемещения кишечника у крыс снизились значительно (P<0.05); в двенадцатиперстной кишке наблюдались воспалительные изменения; интенсивность флуоресценции Occludin и ZO-1 в колоне у крыс значительно снизилась (P<0.01). По сравнению с модельной группой, общее состояние крыс с высокой дозой капсул облепихи значительно улучшилось, показались значительно увеличившимися показатели потребления воды и пищи, а также скорость опорожнения желудка и скорость перемещения кишечника (P<0.05); в двенадцатиперстной кишке воспалительные изменения уменьшились; интенсивность флуоресценции Occludin и ZO-1 в колоне значительно увеличилась (P<0.01). Результаты секвенирования транскриптомы показали, что капсулы облепихи возможно могут регулировать ключевые гены, такие как Slc5a1, Abhd6, для модуляции сигнального пути фосфоинозитид 3-киназа (PI3K)/белка актин, и результаты подтвердили увеличение уровней фосфорилированного белка PI3K и белок актин, и увеличение экспрессии белка интерлюкина (IL)-1β, и увеличение интенсивности флуоресценции IL-6, IL-1β. Вывод исследования состоит в том, что капсулы облепихи могут эффективно улучшить общее состояние крыс с FD и двигательную активность ЖКТ, и возможно, их механизм действия связан с подавлением сигнального пути PI3K/Akt для облегчения воспалительных процессов двенадцатиперстной кишки, и что (E)-этокситал нон-2, (Z)-этокситал нон-2, линариосид А, цинаросид, цимицифугин могут играть ключевую роль в качестве активных компонентов.
关键词
капсулы облепихи; функциональная диспепсия; транскриптомное секвенирование; сильное снижение воспаления двенадцатиперстной кишки; сигнальный путь фосфоинозитид 3-киназа (PI3K)/ белка актин; молекулярная доктинг