Целью было изучение влияния магнитных шаров Bull's Eye на накопление коллагена у мышей с быстрой фиброзом легких и изучение их потенциального клеточного механизма. Методы 40 мышей C57BL/6 были случайным образом разделены на нормальную группу, группу модели, группу декадрона (1,0 мг·кг-1), группу Bull's Eye в низкой дозе (0,75 г·кг-1), группу Bull's Eye в высокой дозе (1,5 г·кг-1). На основе литературных данных и предварительных результатов была использована схема трехкратного удара липополисахаридом (ЛПС) для создания быстрой модели фиброза легких у мышей. После моделирования мышам были введены через гавань Bull's Eye или декадрон для лечения, один раз в день, и забор материала на 5-й день. Гематоксилин-Эозин (ГЭ) окраска для изучения патологических изменений легочной ткани, массонова трехцветная окраска для оценки накопления коллагена; метод иммунного отпечатка (Western blot) для определения уровней экспрессии на компьютере типа I коллаген (Col I), костеобразующего железа (OPN), фактора роста превращения-β₁ (TGF-β₁) в легкой ткани; иммуноистохимический метод (IHC) для локализации CD163-положительных макрофагов в легочной ткани; иммунный флуоресцентный метод для совместной локализации CD163-положительных макрофагов и OPN в легочной ткани; метод потока клеток для определения количества CD163-положительных макрофагов в легочной ткани. Создание модели быстрой фиброза легких, использование магнитной сортировки для изоляции CD163-положительных макрофагов из легочной ткани; метод оценки пролиферации и активности клеток (CCK-8) для определения безвредной дозы Bull's Eye для CD163-положительных макрофагов; ферментно-связанный иммуносорбентный анализ (ELISA) для определения влияния Bull's Eye на уровень секреции OPN у CD163-положительных макрофагов. 24 мыши CD163 сноса (CD163^-/-) были случайным образом разделены на нормальную группу, группу модели, группу Bull's Eye в высокой дозе (1,5 г·кг-1), с использованием диких мышей в качестве контроля. Использование метода потока клеток для оценки удаления CD163; использование Western blot для определения уровней экспрессии col I и OPN в легкой ткани после удаления CD163. Гематоксилин-Эозин (ГЭ) окрашивание и массонова (Masson) окрашивание для изучения патологических изменений ткани и накопления коллагена легкой ткани. Результаты Сравнение с нормальной группой, у мышей в группе модели наблюдалось значительное увеличение накопления коллагена (Р<0,01), значительное увеличение уровня экспрессии белка col I, OPN и TGF-β₁ в легочной ткани (Р<0,05, Р<0,01), значительное увеличение количества CD163-положительных макрофагов (Р<0,01); по сравнению с группой модели, у мышей в группах Bull's Eye в низкой и высокой дозах наблюдается значительное снижение накопления коллагена (Р<0,05, Р<0,01), значительное снижение уровня экспрессии в коллагене I, OPN и TGF-β₁ в легочной ткани (Р<0,05, Р<0,01), заметное снижение количества CD163-положительных макрофагов (Р<0,01). По сравнению с нормальной группой, Bull's Eye значительно снижает уровень секреции OPN у CD163-положительных макрофагов (Р<0,01). По сравнению с группой модели диких мышей, у мышей модели CD163^-/- и группы Bull's Eye наблюдается значительное снижение области накопления коллагена легочной ткани (Р<0,01), снижение уровня экспрессии в коллагене и ОПН в легочной ткани (Р<0,01). Выводы Bull's Eye, путем снижения количества CD163-положительных макрофагов и уровня секреции OPN, ингибирует накопление коллагена у мышей с быстрой фиброзом легких.

Быстрый фиброз легких; магнитные шары Bull's Eye; CD163; костеобразующий железа; накопление коллагена