Целью данного исследования является анализ гена алкоголь оксидазы AlAOX1 у лопуха, чтобы предоставить теоретическую основу для последующего изучения роли гена алкоголь оксидазы. Методы, основанные на предварительных данных по транскриптомам группы проектов, выбрали ген AlAOX1 и провели клонирование гена, биоинформационный анализ, анализ систематики и анализ субклеточной локализации, чтобы определить его генетические характеристики и физико-химические свойства, а также анализ живой балсти с использованием метода реального времени полимеразной цепной реакции (Real-time PCR) для анализа процесса всхождения семян лопуха и выражения гена в разных тканях, и анализ выражения гена в условиях различных абиотических стрессов. Результаты успешно склонировали ген AlAOX1 и загрузили его в национальную базу биотехнологической информации (NCBI). Длина последовательности гена AlAOX1 составляет 2 214 пар оснований, кодирующих 737 аминокислот. Белок AlAOX1 обладает гидрофильностью, является стабильным белком, не имеет мембранной структуры и сигнального пептида, содержит 75 фосфорилированных участков. Анализ филогенетического древа показал, что этот белок сходен с белком тыквы в семействе астровых, и наибольшую схожесть имеет с белком тыквы карлающей. Анализ субклеточной локализации показал, что AlAOX1 локализуется в хлоропластах. Результаты анализа Real-time PCR показали, что количество экспрессии гена AlAOX1 различается в процессе всхождения семян лопуха и в разных тканях, самая высокая в день 9 молодых растений и корнях, составляющей 25,62 ± 3,24 и 1,70 ± 0,11, соответственно, значительно выше, чем в контрольной группе; Результаты экспериментов по абиотическому стрессу показали, что количество экспрессии корня лопуха при высокой соли (200 ммоль·л^-1), засухи (25% PEG) и низкой температуре (4 ℃) достигло максимального значения через 24, 24, 12 часов соответственно, и было значительно выше, чем в контрольной группе, и имело роль в регулировании абиотических стрессов. Выводы эта работа успешно склонировала ген AlAOX1, определила молекулярные характеристики и характеристики выражения, предположила, что он играет роль в росте и развитии лопуха и абиотическом стрессе, и заложила теоретическую основу для дальнейшего изучения конкретной роли гена алкоголь оксидазы у лопуха.

Arctium lappa;alcohol oxidase;gene cloning;expression analysis;subcellular localization