Целью настоящего исследования было изучение механизма действия смеси четырех господ при лечении повреждения печени крыс с симптомами селезеночной недостаточности на основе транскриптомики и экспериментальное подтверждение этого. Метод Выбрали 60 мужских крыс SD методом случайной выборки: пустая группа, модельная группа, группы смеси четырех господ низкой, средней и высокой дозировки (6, 12, 24 г · кг -1 · д -1), а также группа естественного восстановления, по 10 крыс в каждой группе. Используя комплексный множественный факторный метод моделирования (принудительное плавание + внутрижелудочное введение малых доз препарата Сяо Чэн Ци + диетические расстройства), установили модель симптомов селезеночной недостаточности у крыс, провели непрерывное воздействие в течение 30 дней, измерили массу тела, объем пищи за 3 часа, оценили макроскопические симптомы симптомов селезеночной недостаточности. Изучали изменения уровня аспартатаминотрансферазы (AST) и аланинаминотрансферазы (ALT) в крови у крыс всех групп, обсуждали изменения патологии печени крыс при окраске гематоксилином-эозином (HE). Сравнили дифференциальную экспрессию генов (DEGs) между пустой группой, модельной группой и группой смеси четырех господ с высокой дозировкой с использованием метода секвенирования транскриптомов (RNA-Seq), провели анализ обогащения терминов GO и KEGG для DEGs и провели определение N-терминальной структурной области белка вида GSDMD-N аспартатаминотрансферазы (AST) и аланинаминотрансферазы (ALT) в крови у крыс всех групп, обсуждали изменения патологии печени крыс при окраске гематоксилином-эозином (HE). Сравнили дифференциальную экспрессию генов (DEGs) между пустой группой, модельной группой и группой смеси четырех господ с высокой дозировкой с использованием метода секвенирования транскриптомов (RNA-Seq), провели анализ обогащения терминов GO и KEGG для DEGs и провели определение N-терминальной структурной области белка вида GSDMD-N. IF, IHC и результаты Western blot показали, что по сравнению с пустой группой, модельная группа крыс имела значительное снижение массы тела и объема пищи за 3 часа (P & lt;0,01), оценочный балл макроскопических симптомов симптомов селезеночной недостаточности, уровень AST и ALT в сыворотке крови значительно повысились (P & lt;0,01), печени показали легкое воспалительное повреждение; по сравнению с модельной группой, все дозы четырех господ значительно улучшили вышеуказанные показатели и повреждение печени, имеют зависимость от дозировки (P & lt;0,05, P & lt;0,01). Анализ RNA-Seq показал, что по сравнению с пустой группой, модельная группа имела 1254 дифференциально экспрессирующихся генов (DEGs); относительно модельной группы изменилось 842 связанных с этими генов после лечения четырех господ с высокой дозировкой. На основе анализа обогащения терминов GO и KEGG были активированы сигнальные пути NOD-типа признака усталости у крыс с симптомами селезеночной недостаточности, NLRP3 пищевой воспалительный комплекс, вероятно, является ключевой мишенью. Результаты IF, IHC и Western blot показали, что по сравнению с пустой группой, уровень NLRP3, ASC, Caspase-1, GSDMD-N и IL-1 β, IL-6, IL-18 были значительно увеличены у крыс модельной группы (P & lt;0,01); высокая доза четырех господ значительно снизила вышеуказанные белки (P & lt;0,01) и снизила уровень воспалительных факторов IL-1 β, IL-6, IL-18 (P & lt;0,01). Заключение Четыре господина могут эффективно улучшить легкое воспалительное повреждение печени у крыс с симптомами селезеночной недостаточности и обладают дозозависимостью; его механизм может быть связан с ингибированием активации NLRP3/ASC/Caspase-1 пути, подавлением экспрессии GSDMD-N и снижением высвобождения связанных с апоптозом воспалительных факторов.
关键词
Четыре господина; симптомы селезеночной недостаточности; транскриптомика; сигнальный путь NOD; NLRP3 пищевой воспалительный комплекс; воспалительное повреждение печени