Целью исследования было изучение молекулярного механизма того, как сыворотка с лекарственными компонентами супа Гэцзэн Цинлянь ингибирует гликолиз через путь циклоксин-зависимой киназы 16 (CDK16)/MYC мультифункционального фактора транскрипции, способствуя повышению чувствительности клеток колоректального рака (CRC) с устойчивостью к 5-фторурацилу (5-FU) к химиотерапии. Методы: при интервенции сывороткой с супом Гэцзэн Цинлянь в концентрациях 5%, 10%, 20% и 30% использовали метод CCK-8 для определения влияния на чувствительность к 5-FU клеток HCT-116/5-FU, выбрали экспериментальные концентрации 5-FU и супа; тест окраски 5-этинил-2'-дезоксиуридина (EDU) и двойная окраска Annexin V-FITC/йодид пропидия (PI) применялись для оценки изменений пролиферации и апоптоза клеток HCT-116/5-FU под воздействием 5-FU, супа по отдельности и в комбинации; также определяли потребление глюкозы, выработку АТФ и лактата. С помощью вестерн-блоттинга оценивали уровни экспрессии белков, связанных с гликолизом, CDK16, MYC и их фосфорилирование. Техника коиммунопреципитации (Co-IP) применялась для исследования взаимодействия белков CDK16 и MYC, лечение циклогексимидом (CHX) оценивало стабильность белка MYC при сверхэкспрессии CDK16. Результаты: По сравнению с контролем жизнеспособность клеток HCT-116 была значительно снижена при добавлении 2.5 mg·L^-1 5-FU с усилением эффекта при росте концентрации; жизнеспособность клеток HCT-116/5-FU заметно подавилась только при 5 mg·L^-1 5-FU (P < 0.05), выбрана эта концентрация для моделирования. В сравнении с группой только 5-FU заметное угнетение жизнеспособности HCT-116/5-FU наблюдалось при добавлении 5% сыворотки с супом (P < 0.05) и усиливалось с ростом концентрации, далее использовали 5%. По сравнению с контролем пролиферация в группах 5-FU, супа и 5-FU + суп значительно снижалась (P < 0.05), а уровень апоптоза значительно повышался (P < 0.01); при этом подавление пролиферации и снижение потребления глюкозы, продукции АТФ и лактата были наиболее выражены в группе 5-FU + суп (P < 0.01). Кроме того, по сравнению с контролем, 5-FU и супом, ингибирующее влияние на MYC и его фосфорилированную форму было сильнее в группе 5-FU + суп (P < 0.01), с идентично значительным подавлением гликолитических ферментов HK2, PDK1, LDHA и PKM2 (P < 0.01). Также по сравнению с 5-FU группа 5-FU + суп демонстрировала понижение экспрессии CDK16 (P < 0.01), а уровни MYC и его фосфорилированных форм были значительно снижены (P < 0.01). Кроме того, стабильность белка MYC со временем в группе 5-FU + суп снижалась по сравнению с 5-FU (P < 0.05), но компенсировалась при сверхэкспрессии CDK16 (P < 0.05). Вывод: суп Гэцзэн Цинлянь существенно повышает чувствительность клеток HCT-116/5-FU к 5-FU, что может происходить за счет ингибирования CDK16 и, следовательно, снижения MYC-опосредованного гликолиза.

колоректальный рак; устойчивость к 5-фторурацилу (5-FU); MYC; гликолиз; циклин-зависимая киназа 16 (CDK16)