Изучение механизма улучшения синтеза тестостерона в клетках Лейдига экзосомами, нагруженными кверцетином, с точки зрения связи "болезнь-синдром-препарат-лекарство"

WANG Meijing ,  

LAN Xiucheng ,  

WANG Fangyue ,  

ZHANG Jingyi ,  

LI Guangsen ,  

CHANG Degui ,  

YU Xujun ,  

YANG Fang ,  

摘要

Цель исследования основана на многомерном аналитическом подходе "болезнь-синдром-препарат-лекарство" для систематического объяснения роли активных компонентов таблеток Цянцзинь в регуляции пути синтеза тестостерона в клетках Лейдига яичек в условиях окислительного стресса, предоставляя теоретическую основу для традиционной китайской медицины в лечении мужского бесплодия и исследований по модернизации составов. Методы: цели заболевания мужского бесплодия получены из базы данных генов человека (GeneCards, score≥20), базы сравнительной токсикологической геномики (CTD, score≥150), DrugBank (score≥0.2) и DisGeNET (score≥0.2); цели, связанные с синдромом почечной недостаточности и кровяного застоя, получены из базы данных связи симптомов и трав (SymMap). Компоненты таблеток Цянцзинь получены из энциклопедической базы данных по традиционной китайской медицине (ETCM) и платформы интегративной фармакологии TCMIP, отбор проводился с учетом количественной оценки сходства лекарств (QED) ≥ 0.49 и индекса достоверности мишени > 0.8. Взято пересечение целей, построена сеть взаимодействия белок-белок (STRING), визуализация в Cytoscape, проведены функциональная аннотация генов (GO) и обогащение путей KEGG. Через платформу ADMETlab 2.0 по правилам Липински, Pfizer, GSK и Золотого треугольника предсказаны маркеры качества (Q-marker). Экспериментальная часть: использованы клетки Лейдига яичек крыс, экзосомы (Exo) выделены и нагружены активными компонентами ультразвуковым методом. Концентрация Exo определялась набором БКА, морфология изучена трансмиссионной электронной микроскопией, размер частицы - анализатором размера гранул, белки поверхностных маркеров [CD9, CD63, CD81] - методом вестерн-блот, нагрузка лекарства - ВЭЖХ. Модель окислительного стресса инициирована AAPH, клетки разделены на нормальную группу, группу ААПХ, группу кверцетина (Que), группу Exo и группу Exo с кверцетином (Que-Exo). Жизнеспособность клеток определяли методом МТТ, уровни ROS и мембранный потенциал митохондрий измерялись проточной цитометрией, MDA, SOD, GSH-Px, CAT и тестостерон - ELISA, экспрессия стероидогенных ферментов (CYP11A1, HSD3B1, HSD17B3) и регуляторных факторов (SF-1, StAR) с помощью вестерн-блота и ПЦР в реальном времени, количество miR-145-5p анализировалось. Анализ сети фармакологии показал, что основные активные компоненты таблеток Цянцзинь при лечении мужского бесплодия с почечной недостаточностью и кровяным застоем - Que и 6-гидроксиорегматин, ключевой механизм связан с путями синтеза стероидных гормонов. В эксперименте по сравнению с нормальной группой у группы AAPH значительно снизилась жизнеспособность клеток (P<0.01), мембранный потенциал митохондрий (P<0.01), повысились уровни ROS, MDA и miR-145-5p (P<0.01), снизилась активность SOD, GSH-Px, CAT и уровень тестостерона (P<0.01), значительно понизилась экспрессия стероидогенных ферментов, SF-1 и StAR по белку и мРНК (P<0.01). В группах Que и Que-Exo эти показатели были частично восстановлены (P<0.05). В группе Que-Exo по сравнению с Que улучшение жизнеспособности, мембранного потенциала, тестостерона, антиоксидантной активности и ключевой экспрессии путей синтеза стероидов было более выраженным (P<0.05). Вывод: исследование показало, что активный компонент Que из таблеток Цянцзинь, подавляя окислительный стресс, улучшает функцию митохондрий клеток Лейдига, повышает экспрессию стероидогенных ферментов и восстанавливает производство тестостерона. Exo как носитель Que увеличивает стабильность и эффективность доставки, усиливая биологический эффект. miR-145-5p может быть тесно связан с синтезом тестостерона, но молекулярный механизм требует дальнейшего изучения. Исследование соединяет традиционные китайские формулы с современной наукой, расширяя пути модернизации и открывая новые перспективы лечения мужского бесплодия.

关键词

таблетки Цянцзинь;кверцетин;экзосомы;тестостерон;окислительный стресс

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website