Целью исследования является изучение молекулярного механизма действия рецепта Лунь Яньнин на регуляцию miR-328 во внеклеточных везикулах и его влияние на инвазию и метастазирование рака легкого. Методы: в качестве модели использовали клетки рака легких с низкой и высокой метастатической активностью 95C и 95D и изолированные внеклеточные везикулы. Сначала клетки 95C и 95D культивировали in vitro, собирали супернатант для выделения внеклеточных везикул, которые характеризовали с помощью трансмиссионной электронной микроскопии (TEM), анализа отслеживания наночастиц (NTA) и запWestern blot анализа белков; проводили эксперименты по поглощению везикул клетками, чтобы подтвердить способность клеток 95C и 95D поглощать внеклеточные везикулы из плазмы пациентов с раком легких. Использовали тесты на пролиферацию и жизнеспособность клеток (CCK-8) для оценки ингибирующего эффекта рецепта Лунь Яньнин на пролиферацию клеток 95C и 95D при концентрациях (0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.6, 3.2, 6.4 г/л). В зависимости от результатов проводили дальнейшие эксперименты с тремя группами: контрольная и две группы с лечением рецептом Лунь Яньнин (1 и 2 г/л); оценивали влияние рецепта на миграцию и инвазию клеток 95C и 95D in vitro с помощью царапин и Transwell тестов; одновременно с помощью Western blot изучали экспрессию белков Janus-киназы 2 (JAK2), фактора передачи сигнала и транскрипции 3 (STAT3), онкогена c-Fos и активатора ядерного фактора T-клеток 1 (NFATc1); уровни экспрессии miR-328 определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени (Real-time PCR). Результаты: внеклеточные везикулы из плазмы больных раком легких способствовали повышению миграции, инвазии и экспрессии miR-328 в клетках 95C и 95D (P<0.05, P<0.01); рецепт Лунь Яньнин ингибировал пролиферацию и инвазию клеток 95C и 95D дозозависимым образом (P<0.01), с более выраженным эффектом в 95C, снижая уровень miR-328 в внеклеточных везикулах и подавляя экспрессию белков JAK2, STAT3 и их мишеней c-Fos и NFATc1 (P<0.01). Заключение: рецепт Лунь Яньнин, вероятно, подавляет метастазирование рака легких за счет снижения экспрессии miR-328 во внеклеточных везикулах, а механизм может быть связан с сигнальным путем STAT3/c-Fos/NFATc1. Требуется дальнейшее исследование механизма и клиническое применение этого подхода для лечения рака легких с использованием традиционной китайской медицины.

рецепт Лунь Яньнин; внеклеточные везикулы; miR-328; рак легких; инвазия и метастазирование