Целью исследования является изучение作用 и механизмов действия нового рецепта Huangqi Jianzhong Tang (HQJZ) в облегчении состояния предрака желудка (GPC). В in vitro экспериментах использовали N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (MNNG) для индукции злокачественной трансформации эпителиальных клеток слизистой оболочки человеческого желудка, создавая модель клеток GPC (MC клетки). Эксперимент разделили на 4 группы: контрольная, модельная, низкодозная группа HQJZ (HQJZ-L) и высокодозная (HQJZ-H). Контрольные и модельные группы культивировали в полном питательном средстве, группы HQJZ-L и HQJZ-H получали соответственно низкую дозу (0.5 г/л) и высокую дозу (1.0 г/л) HQJZ. Токсичность HQJZ оценивали методом CCK-8, инвазию МС клеток — методом Transwell, апоптоз клеток — с помощью Annexin V-FITC/PI, уровни реактивных форм кислорода и митофагию — иммуннофлуоресценцией, а экспрессию ключевых белков — методом Вестерн-блоттинга. В in vivo экспериментах здоровых мышей BALB/c индуцировали MNNG для создания модели GPC, разделив 24 мыши на 4 группы: контрольную, модельную, HQJZ-L и HQJZ-H. Контрольные и модельные мыши получали физиологический раствор (10 мл/кг/сут), HQJZ-L и HQJZ-H — HQJZ в низкой (6.24 г/кг/сут) и высокой (12.48 г/кг/сут) дозах соответственно. После завершения лечения проводили гистологический анализ желудочной ткани с окрашиванием H&E и AB-PAS. Определяли уровни ROS и LC3 в слизистой желудка иммуннофлуоресценцией, апоптоз клеток — методом TUNEL. Вестерн-блот и иммуноцитохимия выявили экспрессию клеточных маркеров пролиферации KI-67, PCNA и транскрипционного фактора FoxO3. Результаты показали, что HQJZ дозозависимо снижает жизнеспособность MC клеток по сравнению с контролем (P<0.05, P<0.01). Тест Transwell показал существенное увеличение инвазии в модельной группе (P<0.05) и значительное снижение в HQJZ-группах (P<0.05). Макроскопические и гистопатологические оценки желудка показали повышение оценки в модели и снижение в HQJZ группах (P<0.05). Микроскопия выявила изменения митохондрий, включая увеличение их количества и изменённую структуру шероховатого ЭПР в HQJZ группах. Анализы активности митохондрий и апоптоза показали увеличение зелёной флуоресценции митохондрий (P<0.05) и различные изменения в ДСФХ-DA, красной флуоресценции, ROS, GSH, MDA и сигнале LC3. HQJZ улучшал морфофункциональное состояние митохондрий и уровень апоптоза. Иммуноцитохимия и Western blot выявили повышение в числе PCNA- и KI-67-положительных клеток, а также уровней FoxO3, SIRT1 и Bcl-6 в модели, которые снизились под влиянием HQJZ. Вывод: HQJZ регулирует функцию митохондрий и стимулирует апоптоз при злокачественной трансформации GPC через путь FoxO3/ROS, ослабляя развитие предрака желудка.

предрак желудка; новый Huangqi Jianzhong Tang; белок FoxO3; активные формы кислорода (ROS); митохондрии