Цель исследования основана на методе укрепления почек и активации кровообращения, чтобы изучить, влияет ли рецепт укрепления почек и активации кровообращения на коммуникацию клеток маточно-плацентарного интерфейса посредством регуляции микроРНК (miRNA), происходящих из экзосом (Exo), и тем самым улучшает нарушения имплантации эмбриона, вызванные недостаточностью почек и кровяным застоем. Методика: у животных, за исключением пустой группы, перорально вводили гидроксимочевину в дозе 450 мг/кг в течение 10 дней и адреналин в дозе 0,3 мг/кг в течение 7 дней подряд. При помощи мифепристона в дозе 5,5 мг/кг был сформирован модельный крысинный модель нарушения имплантации эмбриона, вызванного недостаточностью почек и кровяным застоем. Группы с высокой, средней и низкой дозами рецепта укрепления почек и активации кровообращения получали 7,30, 3,65 и 1,83 г/кг соответственно перорально, группа дидрогестерона получала 2,63 мг/кг в течение 10 дней. После вмешательства патологические изменения в матке наблюдали с помощью окраски гематоксилин-эозин (HE), уровни экспрессии слизина 1 (MUC1), фактора транскрипции FoxO1 и HoxA10 определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени (Real-time PCR) и западного блоттинга (Western blot); в клеточных экспериментах в качестве объектов исследования использовали первичные эпителиальные клетки эндометрия (EEC) и трофобластические клетки (TC), готовили сыворотку без экзосом с лекарственными веществами методом ультрацентрифугирования и дополняли полный средой, экстрагировали Exo из надосадочной жидкости клеток для перекрестного культивирования; через 48 часов оценивали миграцию и инвазию с помощью эксперимента царапания и метода Transwell, а также выполняли секвенирование miRNA в Exo, происходящих из EEC. Результаты: после моделирования эндометрий крыс истончился, уменьшилось количество сосудов и желез, сократилось количество пиноцитозных выступов; рецепт укрепления почек и активации кровообращения улучшал морфологию эндометрия, увеличивал количество пиноцитозных выступов; уровень экспрессии MUC1, FoxO1 и HoxA10 у всех групп после моделирования снизился (P<0,05), а в группах со средней и высокой дозой вмешательства рецепта повысился (P<0,05); через 24 часа после вмешательства сыворотки без Exo скорость миграции и инвазии в группе рецепта укрепления почек и активации кровообращения значительно повысилась (P<0,01); GO-анализ и KEGG-анализ секвенирования Exo, происходящих из EEC, показали основных обогащение биологических процессов, таких как гаструляция, регулирование дифференцировки нейронов, развитие и регенерация клеток, а также работа сигнальных путей MAPK, FoxO1, Wnt, mTOR и TNF. Заключение: рецепт укрепления почек и активации кровообращения посредством регуляции miRNA, происходящей из экзосом, улучшает восприимчивость эндометрия и способствует имплантации эмбриона, что предоставляет потенциальные цели для разработки вспомогательных репродуктивных терапий на основе miRNA экзосом и новые теоретические основания для лечения идиопатического бесплодия с помощью традиционной китайской медицины.

Рецепт укрепления почек и активации кровообращения; Экзосомы; Секвенирование miRNA; Маточно-плацентарный интерфейс