Цель настоящего исследования заключается в изучении влияния отвара крови на метаболизм янтарной кислоты и ингибирование раковых клеток печени, а также выяснение его механизма действия. Был приготовлен сыворотка отвар крови; методика измерения активности пролиферации клеток (CCK-8) использовалась для изучения влияния различных концентраций янтарной кислоты на пролиферацию клеток HepG2 и MHCC97H и определения последующей экспериментальной концентрации; далее была использована методика CCK-8 для изучения влияния сыворотки отвара крови (5%, 10%, 15%) на пролиферацию клеток HepG2 и MHCC97H; для изучения влияния сыворотки отвара крови на период, миграцию, инвазию и апоптоз клеток HepG2 и MHCC97H были использованы метод анализа клеток потоком, методика царапин и методика Transwell; через оценку содержания янтарной кислоты, измерение активности дегидрогеназы янтарной кислоты (SDH) и Western blot для оценки изменения метаболизма янтарной кислоты и ацетилирования янтарной кислоты; метод его механизма действия осуществляется через метод реального времени полимеразной цепной реакции с использованием флуоресцентного метода и Western blot для оценки экспрессии YAP1 и SIRT5; молекулярно-докинговый результат показал, что основные компоненты отвара крови обладают хорошей способностью связывания с целью молекулярной докинговой проверки. Результаты показали, что в сравнении с пустой группой, 1-2 ммоль/л янтарной кислоты значительно способствовала пролиферации клеток HepG2 и MHCC97H (P<0.01); в сравнении с пустой группой ассоциированный с вирусом человеческого иммунодефицита-связанный протеин (HIV-1) со сполерна 1 и 17,5% отвара крови существенно ингибировали пролиферацию клеток HepG2 и MHCC97H (P<0.01); в сравнении с пустой группой, 10% отвара крови способно задерживать клеточный цикл в фазе синтеза ДНК (G0/G1) (P<0.01), при этом существенно ингибировать миграцию клеток HepG2 и MHCC97H (P<0.01) и вторжение (P<0.05, P<0.01), стимулировать апоптоз клеток HepG2 и MHCC97H (P<0.01);; Кроме того,в сравнении с группой с отваром крови, совместный обработанный отвар крови и янтарной кислоты группы клеток HepG2 и MHCC97H, 5- и 15- пролиферация клеток (P<0.05, P<0.01),миграция и способность вторжения (P<0.05, P<0.01) имели явное повышение, в то время как доля клеток в фазе (G0/G1) уменьшилась (P<0.01), и уровень апоптоза клеток также существенно уменьшился (P<0.01); В отношении метаболизма янтарной кислоты, в сравнении с пустой группой, 10% отвара крови значительно уменьшил уровень янтарной кислоты в клетках HepG2 и MHCC97H (P<0.05, P<0.01), увеличил активность SDH (P<0.01) и значительно снизил уровень ацетилирования янтарной кислоты. В отношении пути YAP1/SIRT5, по сравнению с пустой группой, вмешательство 10% отвара крови значительно уменьшило экспрессию mRNA и белка YAP1 для клеток HepG2 и MHCC97H (P<0.05, P<0.01), тогда как экспрессия mRNA и белка SIRT5 была значительно увеличена (P<0.05, P<0.01). Результаты молекулярно-докинговых проверок показали, что между YAP1 и SIRT5, ключевыми компонентами отвара крови со сполер-молекулы YAP1 и SIRT5 имеют хорошую способность связывания. Выводы Подавляющее действие отвара крови происходит путем регулирования сигнального пути YAP1/SIRT5 путем вмешательства в метаболизм янтарной кислоты-ацетилирование янтарной кислоты для подавления раковых клеток в печени.

рак печени; отвар крови; янтарная кислота; ацетилирование; ассоциированный с вирусом человеческого иммунодефицита-связанный протеин (HIV-1) со сполерна 1(YAP1); доведение доказательство о включении рнк 5(SIRT5)