Establishment and Evaluation of Mouse Model of Cerebral Infarction with Qi and Yin Deficiency Syndrome Based on Metabolomics

YUAN Yue ,  

GAO Yunxiao ,  

ZHANG Qiuyan ,  

CHEN Xiaoxiao ,  

SHI Yali ,  

HU Longxiao ,  

LIU Jianxun ,  

REN Junguo ,  

摘要

Целью исследования является разработка метода моделирования мышиной модели недостаточности теплового ветра, вызванной циклочекоцеткомицином (STZ) совместно с фотохимическим методом, и биологическая оценка созданной модели. Метод разделил 40 мышей C57B6 / J на случайные группы: нормальную группу и группу модели, по 20 экземпляров в каждой группе. Группа нормальных не обрабатывалась, группе модели вводили STZ (55 мг / кг-1), по одному разу в сутки, в течение 5 дней. По завершении развития комплексатов кетозетиконазола, через 14 дней случайно брали 10 мышей из нормальной группы для фотохимической группы, и 10 мышей из группы модели для группы STZ + фотохимической группы. Использовали инъекцию раствора розового, совмещенную с облучением лазером с длиной волны 520 нм, что вызвало тромбы у мышей и привело к инсульту у мышей. Путем общего наблюдения за состоянием, массой тела, силой сцепления, аноректальной температурой, поведенческими экспериментами, клеточным метаболизмом клеток, языковыми значениями R, B, G, содержанием трехфосфористого аденозина (ATP), фактором высвобождения кортикотропина (CRF), уровнем триодтиронина (T3) и другими методами оценивали изменения показателей синдрома мышей с недостаточностью теплового ветра; путем анализа содержания сыворотки мышей реактивов окислительного стресса, супероксиддисмутазы (SOD), интерлейкина-1β (ИЛ-1β), ИЛ-6, фактора некроза опухоли-α (TNF-α), а также по оценке оценки Bederson выявляли патологические изменения инсульта у мышей. Наконец, с помощью высокоэффективного жидкостного хроматографии-четырехступенчатого столбца-масс-спектрометрии (UPLC-Q-TOF-MS) анализировали эндогенные метаболиты мышей, делали многофакторный статистический анализ с использованием метода наименьших квадратов-дискриминационного анализа (PLS-DA) и ортогональная частная метод наименьших квадратов-дискриминационного анализа (OPLS-DA), устанавливая критерии отбора данных, как важность переменной в проекции (VIP) & gt; 1, кратность различий (FC) & lt; 0.8 или FC & gt; 1.2, P & lt; 0.05, идентифицировали различные метаболиты, и наконец, использовали сайт MetaboAnalyst 3.0 для анализа обогащения метаболитов, изучения изменений профиля метаболитов недостаточность теплового ветра и биологической базы инсульта. Результаты по показателям синдрома показали, что по сравнению с нормальной группой у мышей группы модели уменьшилась масса тела, повысилась аноректальная температура, уменьшилась способность к резкому движению и эффективность метаболизма энергии клетки, содержание АТФ снизилось, значения R, G, B на языке снизились, скорость регуляции глюкозы уменьшилась ( P & lt; 0.01, P & lt; 0.05). По показателям заболевания у мыши, сравнивая с нормальной группой, Bederson увеличил оценку группы фотохимикатов и STZ + фотохимической, а сцепление снизилось, SOD уменьшился, уровни воспалительных факторов повысились ( P & lt; 0.05). Результаты метаболомного анализа показали хорошую модель разделения компонентов между мышами, существенно различие между компонентами, идентификацию масс-спектрометра получили 44 разных метаболита у мышей с инсультом, недостаточность теплового ветра, из которых 32 метаболита были увеличены, как в триглицериды, моноацилглицериды, фосфолипиды и нейросинлаиды; 12 снизившихся метаболитов, главным образом аминокислоты и метаболиты фосфата. Обогащены образцы недостаточности теплового ветра, которые обнаружили метаболические пути, в основном относящиеся к ансамблю фолиев кислот, биосинтез растворов, обмен фосфолипидами, обмен витамином B6, обмен жировыми путями, и обмен путей сфинголипидами. Для этих путей были включены транспорт липидов, инсулиновое сопротивление и метаболизм энергии. Вывод: инъекция STZ в сочетании с фотохимическим методом обеспечила успешное создание мышиной модели инсульта с недостаточностью теплового ветра и вмешательство в образование фолиевой кислоты, биосинтез растворов, обмен фосфолипидами, обмен витамином B6 и обмен жировыми путями внутренних процессов.

关键词

photochemical method;cerebral infarction;Qi and Yin deficiency syndrome;disease-syndrome combination;metabolomics;streptozotocin(STZ)

阅读全文