предыдущий|следующий

Молекулярное количественное определение лекарственного сырья доунгви и его обработанных продуктов на основе метода Herb-Q

  • role： First author第一作者
  • Affiliation：

    School of Pharmacy， Henan University of Chinese Medicine， Zhengzhou 450046，China

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

  • Email：zmy421317@163.com
  • Introduction：张鸣宇，在读硕士，从事生药鉴定研究，E-mail：zmy421317@163.com
ZHANG Mingyu12,  
  • Affiliation：

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

JIANG Wenjun2,  
  • Affiliation：

    School of Pharmacy， Henan University of Chinese Medicine， Zhengzhou 450046，China

JI Baoyu1,  
  • Affiliation：

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

WANG Yue2,  
  • Affiliation：

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

ZHANG Haitao2,  
  • Affiliation：

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

ZHANG Haobo2,  
  • role： Corresponding author通信作者
  • Affiliation：

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

  • Email：xfeng0413@icmm.ac.cn
  • Introduction：冯雪，博士，助理研究员，从事中药材抗逆育种及质量评价研究，E-mail：xfeng0413@icmm.ac.cn； *
FENG Xue2*,  
  • role： Corresponding author通信作者
  • Affiliation：

    School of Pharmacy， Henan University of Chinese Medicine， Zhengzhou 450046，China

    Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700，China

    Institute of Medicinal Plant Development， China Academy of Medical Sciences， Beijing 100193，China

  • Email：xwli@icmm.ac.cn
  • Introduction：李西文，研究员，博士生导师，从事品质中药材栽培及分子鉴定研究，E-mail：xwli@icmm.ac.cn
LI Xiwen123*

реферат

Цель: доунгви как широко используемое лекарственное и пищевое сырье часто подделывается на рынке, что значительно влияет на клиническую эффективность препаратов. В настоящее время методы качественного определения подделок относительно совершенны, но количественные методы выявления подделок в переработанных продуктах отсутствуют. В настоящем исследовании на примере доунгви и его близкородственного легко подделываемого аналога "земляной доунгви" (корейский доунгви) проведено количественное исследование с целью разработки метода количественного молекулярного анализа лекарственного сырья и изделий из доунгви (Herb-Q), что служит демонстрацией для создания количественных методов анализа лекарственного сырья доунгви и связанных с ним оздоровительных продуктов. Метод основан на отборе специфичных однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) доунгви и корейского доунгви по полным последовательностям хлоропластного генома. Специфические для доунгви участки были выбраны для количественного изучения методом смешивания порошков разных пропорций подделок (линейность, предел количественного определения, предел обнаружения и воспроизводимость). Метод Herb-Q верифицирован на точность количественного определения с использованием трех уровней подделок (15%, 25%, 35%) в препарате "живительно-анальгетическая смесь". Результаты: проведено сравнение 123 последовательностей хлоропластного генома рода доунгви, с учетом внутривидовой консервативности, межвидовой специфичности и требований пиросеквенирования высокого пропускного потока определены положения 9674 (A/G) в последовательности NC_042826.1 и 38592 (T/C) в NC_029393.1, которые служат специфическими молекулярными маркерами доунгви и корейского доунгви соответственно. Для количественного метода Herb-Q на основе позиции 9674 (A/G) доунгви получена линейная зависимость с коэффициентом детерминации R²=0.9974 (>0.99), что свидетельствует о хорошей линейности. Пределы количественного определения и обнаружения составили 2.0%, воспроизводимость хорошая (относительное стандартное отклонение RSD<2.0%). По количественной системе, построенной на методе Herb-Q, при определении уровня подделки корейским доунгви в препарате "живительно-анальгетическая смесь" среднее отклонение трех повторных молекулярных анализов составило 1.3%. Выводы: исследование показывает, что количественный метод Herb-Q, основанный на положении 9674 (A/G) хлоропластного генома доунгви NC_042826.1, применим, объективен и точен для определения доунгви и "земляного доунгви" и продуктов их переработки, что предоставляет техническую поддержку для количественного анализа коммерчески доступных продуктов из доунгви, таких как препараты традиционной китайской медицины, диетические добавки и оздоровительные продукты.

ключеви́че слова́

Метод молекулярного количественного определения лекарственных трав (Herb-Q); доунгви; подделка; пиросеквенирование; количественное исследование

References

  1. 1.
    CHEN Y Z，CHEN F，ZHU J P，et al.Research progress on medicinal food homology traditional Chinese medicine in prevention and treatment of coronary heart disease through regulation of oxidative stress［J］.Chin Tradit Herb Drugs，2022，53（17）：5582-5592.
  2. 2.
    Chinese Pharmacopoeia Commission.Pharmacopoeia of the People's Republic of China：Part One［M］.Beijing：China Medical Science Press，2020：1902.
  3. 3.
    XIE T P，LIU N，WANG Y L，et al.Quality research progress of Angelica sinensis from different regions［J］.Acta Chin Med Pharm，2020，48（1）：72-75.
  4. 4.
    ZHAO R M，CHEN Y，GUO F X，et al.Comparative study on distributed feature of wild Angelica sinensis resources and the difference in growth characteristics with its cultivars native to Min county of Gansu［J］.Acta Pratac Sin，2014，23（2）：29-37.
  5. 5.
    WEI W L，ZENG R，GU C M，et al.Angelica sinensis in China-A review of botanical profile，ethnopharmacology，phytochemistry and chemical analysis［J］.J Ethnopharmacol，2016，190：116-141.
  6. 6.
    WU B H，SUI L J，GUO X Y，et al.Resource and exploitation of Angelica L［J］.J Anhui Agric Sci，2014，42（3）：702-703.
  7. 7.
    JIN K R.Technology of standardized planting and pest control of Angelica sinensis［J］.Agric Technol Equip，2024（6）：163-164，168.
  8. 8.
    LI C Y，MA X X，LIU X L，et al.Quality evaluation and genuine quality formation of Angelicae Sinensis Radix "quality evaluation through morphological identification"［J］.Chin Tradit Herb Drugs，2025，56（3）：1104-1114.
  9. 9.
    ZHANG P，MA X，WANG X L，et al.Study on HPLC fingerprint of different proportions of Angelicae Pubescentis Radix in Angelicae Sinensis Radix［J］.Chin J Chin Mater Med，2018，25（11）：83-86.
  10. 10.
    PRISCA M，LU Z K，LI Z H，et al.Visual identification of angelicae sinensis radix with its adulterants by ultraviolet-visible spectroscopy combined with chemometrics［J］.J Instrum Anal，2024，43（11）：1858-1862.
  11. 11.
    SHI Z F，TENG B X，LAI J，et al.Identification of Levisticum officinale adulterated in Angelica sinensis by PCR-RFLP［J］.Chin J Exp Tradit Med Form，2021，27（9）：168-175.
  12. 12.
    WANG Y D，CHEN M H，YAN J G，et al.Comparison of chemical constituents between Angelica sinensis and Levisticum officinale by UPLC fingerprints combined with chemometrics methods［J］.Chin Tradit Herb Drugs，2022，53（22）：7214-7220.
  13. 13.
    ZHAO K J，DONG T X，ZHAN H Q，et al.contents comparison of ferulic acid，ligustilide and total polysaccharide in Radix Angelicae Sinensis cultivated in China，Japan and South Korea［J］.Front Pharm Sci，2007，10（6）：536-537，540.
  14. 14.
    LIU L X，HONG L，ZHANG H Y，et al.Research progress on chemical constituents and pharmacological activities of Angelica gigas Nakai［J］.J Shenyang Pharm Univ，2022，39（6）：748-759.
  15. 15.
    WANG S，QI L T，WANG P Y，et al.Identification of Angelica sinensis （Oliv.） Diels and its adulterants from different origins based on visual fluorescent probe technology of ITS2 sequence［J］.Mol Plant Breed，2025，doi：.
  16. 16.
    ZHENG M D，SUN M M，HE Z H，et al.Molecular authentication of the medicinal species of Rhizoma et Radix Heraclei，Radix Angelicae Sinensis，Radix Angelicae Pubescentis and Rhizoma et Radix Notopterygii by integrating ITS2 and its secondary structure［J］.Acta Pharm Sin，2021，56（8）：2289-2294.
  17. 17.
    CHE S R，ZHANG J Y，ZHANG Q M，et al.Identification of Angelica sinensis Radix，Angelica pubescens Radix and Levisticum officinale Radix by UV［J］.Subtrop Plant Sci，2020，49（6）：473-476.
  18. 18.
    YAN M Y，FANG M F，ZHU J，et al.Identification of medicinal plants in Angelica L. based on ITS barcode label［J］.Chin Tradit Herb Drugs，2016，47（6）：974-981.
  19. 19.
    YIN W J.Angelica and its easily confused products［J］.Heilongjiang J Tradit Chin Med，2010，39（5）：50-51.
  20. 20.
    Ministry of Health of the People's Republic of China.Good Manufacturing Practice for Drugs （2010 Revision）［M］.Beijing：Ministry of Health of the People's Republic of China，2011.
  21. 21.
    SOLIMENE U，ALKOFAHI A S，ALLEMANN C，et al.WHO guidelines for assessing quality of herbal medicines with reference to contaminants and residues［M］.Geneva： World Health Organization，2007.
  22. 22.
    ZHANG Z Y，WANG Y J，YAN H，et al.Rapid geographical origin identification and quality assessment of Angelicae Sinensis Radix by FT-NIR spectroscopy［J］.J Anal Methods Chem，2021，doi：.
  23. 23.
    WANG B J，YANG Y.Study on the identification of Danggui from different districts and modern pharmacological research［J］.China Med Pharm，2014，4（22）：80-81，101.
  24. 24.
    WANG K，LIU X，CAI G，et al.Chemical composition analysis of Angelica sinensis （Oliv.） Diels and its four processed products by ultra-high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole-orbitrap mass spectrometry combining with nontargeted metabolomics［J］.J Sep Sci，2023，46（24）：e2300473.
  25. 25.
    ZANG H Y，LIAO W B.AFLP analysis on genetic diversity of Angelica sinensis［J］.J Chin Med Mater ，2014，37（4）：572-575.
  26. 26.
    ZHU T T， JIN L，ZHANG P S ，et al.Genetic diversity analysis on Angelica sinensis from different habitats in Gansu province based on ISSR［J］.Chin Tradit Herb Drugs，2015，46（23）：3549-3557.
  27. 27.
    XIONG S Y， LI J P，LI J C，et al.Quantification of bovine-derived ingredients in meat products by duplex droplet digital polymerase chain reaction［J］.Food Sci，2022，43（24）：318-324.
  28. 28.
    ZHAO B，XIONG C，LI J，et al.Species quantification in complex herbal formulas-vector control quantitative analysis as a new method［J］.Front Pharmacol，2020，11：488193.
  29. 29.
    XU W，ZHU P，XIN T，et al.Droplet digital PCR for the identification of plant-derived adulterants in highly processed products［J］.Phytomedicine，2022，105：154376.
  30. 30.
    YU N，XING R，WANG P，et al.A novel duplex droplet digital PCR assay for simultaneous authentication and quantification of Panax notoginseng and its adulterants［J］.Food Control，2022，132：108493.
  31. 31.
    LEE H J，HAN Y S，CHO I S，et al.Development and application of reverse transcription droplet digital PCR assay for sensitive detection of apple scar skin viroid during in vitro propagation of apple plantlets［J］.Mol Cell Probes，2022，61：101789.
  32. 32.
    PEI Y，LIU Z，YU D，et al.Molecular quantification of herbs （Herb-Q）：A pyrosequencing-based approach and its application in Pinellia ternata［J］.Chin J Nat Med，2024，22（7）：663-672.
  33. 33.
    LIU Z，PEI Y，CHEN T，et al.Molecular quantification of Fritillariae Cirrhosae Bulbus and its adulterants［J］.Chin Med，2024，19（1）：138.
  34. 34.
    ZHANG L Y，XU Q，YU J L，et al.Progress in the study of the composition and pharmacological effects of Angelica spp. from Northeast China［J］.J Tonghua Norm Univ，2019，40（8）：60-66.
  35. 35.
    ZHAO C Y，LV H Z.Study on the high performance liquid chromatographic fingerprints of Angelica gigas［J］.Lishizhen Med Mater Med Res，2017，28（11）：2631-2633.
  36. 36.
    LI X W，FENG X，LIU Z Y.A method of extracting DNA from underground parts of medicinal herbs：Chinese Patent，CN202310324604.0［P］.2023-07-04.
  37. 37.
    XIE D H，LI J，XIANG Y L，et al.DNA yield and quality analysis of different tissues from three frog species［J］.Curr Fish，2024，49（4）：76-78.
  38. 38.
    GHEMRAWI M，FISCHINGER F，DUNCAN G，et al.Developmental validation of SpeID：A pyrosequencing-based assay for species identification［J］.Forensic Sci Int Genet，2021，55：102560.
  39. 39.
    BERG V D.Definition of minimum performance requirements for analytical methods of GMO testing［M］.Brussels： European Union Reference Laboratory for Genetically Modified Food and Feed，2015.
  40. 40.
    ZHOU X，LI C G，CHANG D，et al.Current status and major challenges to the safety and efficacy presented by Chinese herbal medicine［J］.Medicines （Basel），2019，doi：.
  41. 41.
    CHEN Y，FENG L L，HUANG R，et al.Identification of Atractylodes chinensis and A. japonica based on SCAR molecular markers and DNA barcoding technology［J］.World Sci Technol Mod Tradit Chin Med，2024，26（2）：490-501.
  42. 42.
    WANG M Y，WAN L C，ZHAO W，et al.Identification of Dendrobium officinale Kimura et Migo by PCR-RFLP［J］.Chin J Pharm Anal，2023，43（3）：509-515.
  43. 43.
    WEI J X，LI Y F，YANG X J，et al.Research on herbal research，chemical composition and pharmacological action of different medicinal parts of Angelica sinensis［J］.China Arch Tradit Chin Med，2024，42（10）：127-134.
  44. 44.
    YANG Y，YU C Q，GUO Z X，et al.Quality characteristics of Angelicae Sinensis Radix from different producing areas based on HPLC fingerprint and multi-component quantitative analysis［J］.Chin Tradit Herb Drugs，2021，52（15）：4666-4674.
  45. 45.
    MUZZEY D，EVANS E A，LIEBER C.Understanding the basics of NGS：From mechanism to variant calling［J］.Curr Genet Med Rep，2015，3（4）：158-165.
  46. 46.
    BOERS S A，JANSEN R，HAYS J P.Understanding and overcoming the pitfalls and biases of next-generation sequencing （NGS） methods for use in the routine clinical microbiological diagnostic laboratory［J］.Eur J Clin Microbiol Infect Dis，2019，38（6）：1059-1070.
  47. 47.
    NASH P A，SILVA-PINHEIRO P，MINCZUK M A.Genotyping single nucleotide polymorphisms in the mitochondrial genome by pyrosequencing［J］.J Vis Exp，2023，doi：.
  48. 48.
    XU S Y，ZHAO X，ZHANG F L，et al.Study on authenticity identificationmethod of honeysuckle based on pyrosequencing analysis technology［J］.Curr Biotechnol，2020，10（6）：637-645.
  49. 49.
    JIANG W，PEI Y，ZHANG M，et al.Fluorescent signal-based molecular method for identification and quantification of adulteration in Panax ginseng from raw materials to processed products［J］.Food Bioscience，2025，68：106426.

Читать полностью

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website