Цель: Поскольку дягиль китайский (当归) является широко используемым лекарственным сырьем, нередко возникают случаи подделки на рынке, что серьезно влияет на клиническую эффективность препаратов. В настоящее время технологии качественного определения подделок достаточно развиты, но методы количественного контроля подделок в переработанных продуктах отсутствуют. В данном исследовании на примере дягиля китайского и его близкородственного часто подделываемого аналога – корейского дягиля – проводилось количественное исследование с целью создания молекулярного метода количественного определения лекарственного сырья и продуктов переработки (Herb-Q), который будет служить образцом для разработки количественных методов контроля лекарственного сырья дягиля и связанных с ним товаров для здоровья. Метод основан на скрининге специфичных однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) в полном хлоропластном геноме дягиля китайского и корейского. Специфичные для дягиля положения использовались для методологического изучения количественного определения с использованием пудры лекарственного сырья с различными долями подделок (линейность, количественный лимит, предел обнаружения, воспроизводимость). Для проверки точности метода Herb-Q при количественном определении китайских готовых лекарственных средств, содержащих дягиль, использовали три разных уровня подделки (15%, 25%, 35%) в активной обезболивающей смеси. Результаты: Сравнение 123 последовательностей хлоропластного генома рода дягиля позволило на основе внутривидовой консервативности, межвидовой специфичности и соответствия требованиям пиросеквенирования определить положения 9674 (A/G) в последовательности NC_042826.1 и 38592 (T/C) в последовательности NC_029393.1 как специфичные молекулярные маркеры для дягиля китайского и корейского соответственно. Положение 9674 (A/G), специфичное для дягиля китайского, было выбрано для построения линейной модели Herb-Q с R²=0.9974 (>0.99), что свидетельствует о хорошей линейности. Количественный предел и предел обнаружения составили 2.0%, воспроизводимость была хорошей (относительный стандартный отклонение (RSD) <2.0%). Количественная система на основе Herb-Q показала среднюю ошибку повторных измерений в 1.3% при определении подделки корейского дягиля в активной обезболивающей смеси. Вывод: Исследование показало, что метод Herb-Q, основанный на положении 9674 (A/G) хлоропластного генома NC_042826.1 дягиля китайского, обладает хорошей применимостью, объективностью и точностью для идентификации дягиля китайского и корейского, а также их переработанных продуктов, и может служить технической поддержкой для количественного анализа коммерческих продуктов на основе дягиля, таких как китайские медицинские препараты, диетические добавки и оздоровительные продукты.

Молекулярный количественный метод определения трав (Herb-Q); дягиль китайский; подделка; пиросеквенирование; количественное исследование