Целью является построение конкурентной эндогенной РНК (ceRNA), связанной с микроРНК-342-3p (miR-342-3p), и изучение молекулярного механизма, с помощью которого таблетки Данло (DLT) улучшают отложение липидов в печени через циркулярную РНК, богатую цистеином трансмембранного регулятора BMP1 (circCRIM1) / miR-342-3p / транскрипционный фактор SRY-box 6 (SOX6), посредствующую синтез жирных кислот. Методом использовались базы данных для построения сети регуляции ceRNA, связанной с miR-342-3p, а также двойной люциферазный репортёрный анализ для подтверждения целевого взаимодействия circCRIM1/miR-342-3p и miR-342-3p/SOX6. В экспериментах in vivo мыши C57BL/6 служили контрольной группой с обычным кормлением, генетически модифицированные ApoE^-/- мыши были случайным образом разделены на модельную группу, три дозы DLT (низкая, средняя и высокая — DLT-L, DLT-M, DLT-H соответственно, 340, 680, 1360 мг·кг^-1·сут^-1) и группу симвастатина (2,275 мг·кг^-1·сут^-1). Модель была создана кормлением жирной диетой в течение 12 недель, затем в течение 4 недель проводили одновременную интрагастральную пероральную терапию. Автоматический биохимический анализатор использовали для определения уровней липидов и функции печени в сыворотке крови мышей, наборы реактивов для определения уровней липидов в печени. Гистопатологические изменения печени изучали с помощью окраски гематоксилин-эозином (HE) и окраски Oil Red O. Экспрессию circCRIM1 и miR-342-3p в печени измеряли с помощью количественной ПЦР в реальном времени, экспрессию SOX6, PPARγ, LXRα, SREBP1c на уровне мРНК и белка выявляли с помощью ПЦР в реальном времени и автоматизированной системы Wes Western blot. Иммуногистохимия использовалась для определения экспрессии SOX6 в тканях печени. В in vitro экспериментах моделировали накопление липидов в клетках HepG2 с помощью олеиновой кислоты (OA), клетки делили на контрольную группу (CON), группу OA (400 мкмоль·л^-1 OA), группу с плазмой без препарата (BS) (400 мкмоль·л^-1 OA + 10% плазмы без препарата) и группу DLT (400 мкмоль·л^-1 OA + 10% плазмы с препаратом DLT). Биохимические наборы использовали для определения уровня липидов в HepG2, морфологические изменения наблюдали с помощью окраски Oil Red O. Выполняли сверхэкспрессию circCRIM1 (OE-cricCRIM1), ингибирование miR-342-3p (ингибитор miR-342-3p) и интервенцию ДЛТ плазмой, определяли уровни экспрессии circCRIM1, miR-342-3p и соответствующих мРНК с помощью количественной ПЦР. В in vivo эксперименте по сравнению с контролем в модельной группе отмечались значительные нарушения липидного профиля крови, функции печени и уровня липидов в печени (P<0.01), изменения структуры тканей печени, увеличение вакуолизации и липидных капель, значительное повышение circCRIM1, значительное снижение miR-342-3p, значительное повышение экспрессии SOX6, PPARγ, LXRα, SREBP1c на уровне мРНК и белка (P<0.01). По сравнению с моделью у мышей, получавших DLT в разных дозах, наблюдалось значительное улучшение липидных показателей сыворотки крови, функции печени и уровня липидов в печени (P<0.05, P<0.01), снижение повреждения печени и накопления жировых капель, снижение экспрессии circCRIM1, значительное повышение miR-342-3p, значительное снижение экспрессии SOX6, PPARγ, LXRα, SREBP1c на уровне мРНК и белка (P<0.05, P<0.01). В in vitro эксперименте по сравнению с CON в группе OA уровень липидов в клетках HepG2 значительно увеличился (P<0.01), количество и размер жировых капель увеличились, после введения ДЛТ плазмы наблюдалось улучшение; при сверхэкспрессии cricCRIM1 значительное повышение уровней circCRIM1 и SOX6 мРНК, значительное снижение miR-342-3p (P<0.05, P<0.01); при ингибировании miR-342-3p значительное повышение SOX6 мРНК и значительное снижение miR-342-3p (P<0.01); при введении ДЛТ плазмы значительное повышение miR-342-3p и значительное снижение SOX6, PPARγ, LXRα, SREBP1c мРНК (P<0.01). Заключение: DLT может улучшать отложение липидов в печени, регулируя синтез жирных кислот через путь circCRIM1/miR-342-3p/SOX6, способствуя профилактике и лечению атеросклероза.

Таблетки Данло; Атеросклероз; циркулярная РНК с богатым цистеином трансмембранного регулятора BMP1 (circCRIM1) / микроРНК-342-3p (miR-342-3p) / трансрипционный фактор SRY-box 6 (SOX6); синтез жирных кислот; отложение липидов в печени