Влияние путей апоптоза/пироптоза, опосредованных Apaf1, воспринимающего MPT, на депозицию липидов гепатоцитов и интервенция супом Дити Tang

ZHU Jingxuan ,  

SONG Nan ,  

LIU Yu ,  

DONG Yuanguang ,  

JIA Lianqun ,  

PEI Yupeng ,  

摘要

Целью является исследование того, улучшает ли суп Дити Tang (DTT) депозицию липидов в клетках печени, индуцированную олеиновой кислотой (OA), путем регуляции фактора активации каспазы 1 (Apaf1), который воспринимает митохондриальную переходную проницаемость (MPT), опосредующую пути апоптоза/пироптоза. Метод: клетки человеческой гепатоцеллюлярной карциномы (HepG2) были индуцированы 800 мкмоль/л OA для создания модели депозиции липидов в клетках печени. Оптимальные условия вмешательства с сывороткой, содержащей DTT, и ингибитором Apaf1 ZYZ488 были определены с помощью анализа клеточной пролиферации и жизнеспособности (CCK-8). Клетки HepG2 были разделены на контрольную группу, группу OA (800 мкмоль/л), группу OA (800 мкмоль/л) + сыворотка-контроль (SC) (10%), группу OA (800 мкмоль/л) + DTT (10%) и группу OA (800 мкмоль/л) + ZYZ488 (1 мкмоль/л). Изменения депозиции липидов в клетках печени оценивали с помощью окрашивания Oil Red O, определения уровней триглицеридов (TG) и свободных жирных кислот (NEFA); открытие митохондриальных переходных пор (MPTP) и изменение мембранного потенциала митохондрий оценивали с помощью флуоресцентного окрашивания Calcein AM и JC-1; подсчитывали количество клеток, подвергшихся апоптозу и пироптозу, методом проточной цитометрии; экспрессию Apaf1, GSDME, PARP1, Caspase-3, Caspase-4, Caspase-9 мРНК определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени; экспрессию Apaf1 определяли методом иммунной флуоресценции; экспрессию белков Apaf1, GSDME, PARP1, Caspase-3, Caspase-4, Caspase-9, активных (клиппированных) Caspase-3 и cleaved Caspase-9 анализировали методом вестерн-блоттинга. Результаты: сыворотка, содержащая DTT, значительно снижала уровни TG и NEFA, вызванные OA, в клетках HepG2 (P<0,01), и эффективно улучшала накопление липидных капель в гепатоцитах. Сыворотка также ингибировала чрезмерное открытие MPTP и снижение мембранного потенциала митохондрий (P<0,01). Кроме того, сыворотка снижала экспрессию ключевых белков и мРНК, связанных с апоптозом (Caspase-9/Caspase-3/PARP1) и пироптозом (Caspase-4/Caspase-3/GSDME), опосредованными Apaf1 (P<0,05), эффект был схож с действием ZYZ488. Заключение: суп Дити Tang улучшает депозицию липидов в гепатоцитах путем подавления путей апоптоза и пироптоза, которые опосредованы Apaf1 и MPT.

关键词

депозиция липидов гепатоцитов;суп Дити Tang;фактор активации каспазы 1 (Apaf1);митохондриальный переходный поровый комплекс (MPT);апоптоз;пироптоз

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website