Цель исследования — изучить влияние decoction Er Chen Tang на улучшение массы тела мышей с простым ожирением, вызванным высокожировой диетой, и механизм действия. Метод: сначала проведен анализ изменений транскрипционного уровня в ткани подвздошной кишки нормальной группы и модели ожирения, вызванной высокожировой диетой, с помощью одиночной клеточной транскриптомики (Sc-RNAseq). Затем была создана модель простого ожирения у мышей путем кормления высокожировой диетой. Успешно смоделированные мыши были рандомизированы на модельную группу и группы с низкой, средней и высокой дозами Er Chen Tang (7.5, 15, 30 г·кг^-1), по 8 мышей в каждой, также взято 8 мышей того же возраста в качестве нормальной группы. В течение 4 недель с помощью зондирования желудка в фиксированное время измеряли массу тела. Общая эффективность Er Chen Tang в улучшении ожирения оценивалась с помощью теста толерантности к глюкозе, поведенческих тестов, гематоксилин-эозинового (HE) окрашивания и биохимического анализа. Прогнозировалась степень связывания между соответствующими белками с помощью докинга белков. Молекулярный докинг предсказывал степень связывания ключевых компонентов Er Chen Tang с целевыми белками. Методом количественной ПЦР в реальном времени (Real-time PCR) измеряли уровни экспрессии мРНК факторов опухолевого некроза — TNF-α, индуцируемого оксида азота синтазы (iNOS), интерлейкина-1β (IL-1β), CD68, CD206, белка замыкательных поясов-1 (ZO-1) и Claudin-5 в подвздошной кишке. Иммуннофлуоресцентная окраска использовалась для наблюдения экспрессии и распределения Claudin-5 и ZO-1. Результаты: предварительные данные одиночного клеточного секвенирования показали, что по сравнению с нормальной группой дифференциальные гены иммунных клеток модельной группы обогащены биологическими функциями, связанными с липидным и воспалительным метаболизмом, а также воспалительным путем JAK/STAT. По сравнению с нормальной группой мышей модельная группа показала значительное увеличение массы тела (P<0.01), значительное повышение уровня глюкозы в крови (P<0.01), значительное снижение силы конечностей (P<0.01), увеличение массы печени (P<0.05), значительное повышение уровня сывороточных ALT и AST (P<0.05, P<0.01), увеличение жировых вакуолей в печени, значительное увеличение объема адипоцитов белой жировой ткани надкопытной и паховой областей, усиление воспаления; по сравнению с модельной группой, мыши, получавшие Er Chen Tang в различных дозах, показали значительное снижение массы тела (P<0.01), значительное понижение уровня глюкозы в крови (P<0.01), значительное увеличение силы конечностей (P<0.05, P<0.01), значительное снижение массы печени (P<0.05, P<0.01), значительное снижение уровней ALT и AST в сыворотке (P<0.05, P<0.01), уменьшение жировых вакуолей в печени, значительное уменьшение объема адипоцитов белой жировой ткани надкопытной и паховой областей, улучшение воспаления. Возможно взаимодействие между белками CD68 и ZO-1, Claudin-5, а также CD206 и ZO-1, Claudin-5. Ключевые компоненты Er Chen Tang — нобилетин, диозметин и нарингин — показали сильную связывающую способность с целевыми белками ZO-1 и Claudin-5. По сравнению с нормальной группой в модельной группе значительно повысилась экспрессия мРНК провоспалительных генов TNF-α, iNOS, IL-1β, CD68 (P<0.05, P<0.01), и значительно снизилась экспрессия мРНК противовоспалительного гена CD206 (P<0.01), а также снизилась экспрессия мРНК генов белков плотных соединений Claudin-5 и ZO-1 (P<0.05, P<0.01); по сравнению с модельной группой группы с различными дозами Er Chen Tang показали значительное снижение экспрессии мРНК провоспалительных генов TNF-α, iNOS, IL-1β, CD68 (P<0.05, P<0.01), значительное повышение мРНК противовоспалительного гена CD206 (P<0.05, P<0.01), значительное повышение экспрессии мРНК генов Claudin-5 и ZO-1 (P<0.05, P<0.01). По сравнению с нормальной группой экспрессия белков плотных соединений Claudin-5 и ZO-1 значительно снижена в модельной группе (P<0.01); по сравнению с модельной группой экспрессия белков Claudin-5 и ZO-1 значительно повышена в группах с различными дозами Er Chen Tang (P<0.05, P<0.01). Вывод: Er Chen Tang значительно улучшает увеличение массы тела, вызванное высокожировой диетой, возможно, за счет улучшения воспалительной среды подвздошной кишки и восстановления поврежденного иммунного барьера подвздошной кишки.

ожирение;жировая ткань;воспаление;иммунный барьер;белки плотных соединений