Механизм действия пластыря Цзиньян Динтун, блокирующего ионные каналы TRPs, для улучшения периферической гиперчувствительности и синовиального фиброза при остеоартрите коленного сустава
Цель исследования заключалась в изучении механизма действия пластыря Цзиньян Динтун, который улучшает периферическую гиперчувствительность и синовиальный фиброз у крыс с остеоартритом коленного сустава (KOA) путем блокирования ионных каналов потенциала транзиентных рецепторов (TRPs). Активные компоненты пластыря определяли с применением технологии сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией (UPLC-ESI-QTRAP MS/MS). Модель KOA у крыс была создана путем инъекции йодноуксусной кислоты в суставную полость. Крысы случайным образом разделены на группы: контрольную, KOA, группу скомбинированного пластыря Nanxing и группу пластыря Цзиньян, по 8 животных в каждой. Группы скомбинированного пластыря Nanxing и Цзиньян получали местное лечение. После курса интервенции оценивали пороги болевой чувствительности к холодовым и механическим раздражителям, а также меряли поперечный диаметр коленного сустава. Концентрации провоспалительных факторов интерлейкина-1β (IL-1β), фактора некроза опухоли-α (TNF-α), фактора роста нервов (NGF) и кальцитонин-ген-связанного пептида (CGRP) определяли методом иммуноферментного анализа (ELISA). Уровни экспрессии белков TRPA1, TRPM8, TRPV1, TRPV4, трансформирующего фактора роста-β (TGF-β) и сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) в синовиальной ткани анализировали методом вестерн-блоттинга. Гистопатологические изменения синовиальных тканей исследовали с помощью гематоксилин-эозиновой (HE), массони и пикрофуксиновой окраски, экспрессию коллагена I типа и α-SMA определяли с помощью мультиплексного иммунофлуоресцентного анализа. В результате с помощью UPLC-MS/MS было идентифицировано 35 активных компонентов в трансдермальной жидкости пластыря Цзиньян, включая фенольные кислоты, флавоноиды, хиноны, алкалоиды, терпены, лигнаны и кумарины, такие как берберин, пэонифлорин, феруловая кислота и кофейная кислота, которые обладают выраженным противовоспалительным, обезболивающим и антифибротическим действием. По сравнению с контрольной группой у крыс с KOA значительно снизились пороги боли на холод и механическое воздействие (P<0.01); после 14 и 28 дней лечения пластырем Цзиньян пороги боли значительно повысились по сравнению с группой KOA (P<0.01), при этом различий с группой скомбинированного пластыря Nanxing не выявлено. Кроме того, пластырь Цзиньян уменьшал уровни IL-1β, TNF-α, NGF и CGRP в сыворотке (P<0.01), снижал экспрессию белков TRPA1, TRPM8, TRPV1, TRPV4, TGF-β и VEGF в синовиальной ткани (P<0.01), улучшал патологические повреждения синовиальной ткани и снижал интенсивность флуоресценции коллагена I типа и α-SMA (P<0.01). Вывод: пластырь Цзиньян улучшает периферическую гиперчувствительность и синовиальный фиброз у крыс с KOA, подавляя ионные каналы TRPs и связанные с ними воспалительные и фибротические факторы.