Цель исследования заключается в изучении иммуномодулирующего действия полисахарида кви-гуй на клетках макрофагов RAW264.7, индуцированных липополисахаридом (LPS), и оценке защитного действия AAPS-4a, активного компонента полисахарида кви-гуй, с помощью структурной характеристики и оценки защитного действия при язвенном колите (UC). Методы. Полисахариды кви-гуй (0,01~100 мг·L^-1) и их влияние на пролиферацию клеток RAW264.7 и их активность были исследованы методом теста на пролиферацию и активность клеток (CCK-8). Методом иммуноферментного анализа (ELISA) были изучены влияние 6 типов полисахаридов кви-гуй (3,10 мг·L^-1) на уровень выделения опухолевого некрозающего фактора-α (TNF-α), интерферона-β (IFN-β) и оксида азота (NO) макрофагами RAW264.7, индуцированными LPS. Активные полисахариды были отобраны и их униформность и молекулярная масса были определены с использованием высокоэффективной обратнофазной хроматографии (HPSEC). Их функцional groups были определены методом Фурье-преобразований инфракрасного спектра (FT-IR), а анализ их моносахаридного состава проводился методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC). Данные комплексного анализа типа и способа связывания остатков сахара были получены с использованием методов газовой хроматографии-масс-спектрометрии (GC-MS) двумерной ядерной магнитно-резонансной спектроскопии (NMR). Экспериментальные животные были разделены на нормальную группу, группу модели, группу низкой дозы AAPS-4a (50 мг·кг^-1), группу высокой дозы AAPS-4a (100 мг·кг^-1) и группу сульфасалазина (SASP) (75 мг·кг^-1), кроме нормальной группы, используя 3,5% натрия альгинат (DSS) для индукции активной модели UC у мышей. Каждая группа была непосредственно заброксированная при сопоставимой дозе в течение 7 дней, их изменения веса мышей были регистрированы. После окончания лечения были вычислены показатели индекса селезенки и активности заболевания (DAI), уровень TNF-α и интерлейкина-6 (IL-6) в крови были изучены методом ELISA, а патологические изменения в толстой кишке были исследованы методом гистологии с окраской гематоксилином-эозином (HE). Результаты. На макрофагах AAPS-4a, препарат AAPS-4a дозавозависимо ингибировал уровень TNF-α, IFN-β, и NO, индуцированных LPS (р<0.01). Структурная характеристика AAPS-4a показала, что AAPS-4a - это униформальный полисахарид с молекулярной массой 7,6×10³ Да, включающий манный (Man), глюкозу (Glc) и галактозу (Gal), с мольным соотношением 1,3∶23,9∶1,0, включающий 1,6-α-D-Glcp, T-α-D-Glcp, 1,3-β-D-Galp, 1,4-α-D-Manp и 1,2-α-D-Galp пять видов остатков сахара. В экспериментах in vivo группа модели мышей сравнивалась с группой модели, активные группы могли снизить показатели индекса селезенки и активности заболевания и уровень TNF-α, IL-6, улучшить атрофию толстой кишки (р<0,05, р<0,01). Патологическое наблюдение показало, что AAPS-4a может ярко ингибировать воспаление ткани толстой кишки и уменьшить её патологическое повреждение. Вывод. AAPS-4a - это нейтральный униформальный полисахарид, включая 1,6-α-D-Glcp, T-α-D-Glcp, 1,3-β-D-Galp, 1,4-α-D-Manp и 1,2-α-D-Galp, ключевой активный компонент кви-гуй, проявляющий анти-UC свойства целого лекарственного травника, имеющий потенциальную ценность в клинической практике.

гульцао да-гундун; полисахарид; высокоэффективная жидкостная хроматография (HPLC); газовая хроматография-масс-спектрометрия (GC-MS); ядерная магнитно-резонансная спектроскопия (NMR); иммуномодуляция; язвенный колит (UC)