Целью исследования было изучить влияние полисахаридов астрагала (APS) на регуляцию сигнального пути Toll-подобного рецептора 4 (TLR4)/ядерного фактора транскрипции-κB (NF-κB) при модели оксигенно-глюкозного дефицита/реперфузии (OGD/R) в поляризации клеток микроглии BV2. Метод: была установлена модель повреждения клеток микроглии BV2 методом OGD/R, группы: контрольная, OGD/R и APS (0.4 г/л APS); индуцировано нейровоспаление липополисахаридом (LPS) с вмешательством APS, группы: контрольная, LPS (1 мг/л LPS) и APS (0.4 г/л APS + 1 мг/л LPS). Оценивали жизнеспособность клеток с помощью метода CCK-8; морфологию клеток изучали с помощью инвертированного микроскопа; содержание оксида азота (NO) в супернатанте определяли методом Гриесса; уровни секреции факторов опухолевого некроза-α (TNF-α), интерлейкинов IL-6, IL-10 и IL-4 измеряли иммуноферментным методом (ELISA); выявляли двойноположительную экспрессию кальций-связывающего адаптерного белка-1/индуцибельной NO-синтетазы (Iba-1+/iNOS+) и кальций-связывающего адаптерного белка-1/аргиназы 1 (Iba-1+/Arg1+) и ядерную транслокацию NF-κB p65 методом иммуногистохимии (IF); анализировали уровни белков Iba-1, iNOS, Arg1, TLR4, NF-κB p65 иммуноблоттингом (Western blot). Результаты: в модели OGD/R по сравнению с контролем активировались BV2 микроглия, наблюдались амебоподобные изменения, значительно повышались уровни NO, TNF-α, IL-6 (P<0.01), уровень двойноположительной экспрессии Iba-1+/iNOS+, а также экспрессия белков Iba-1, iNOS (P<0.01), возрастала ядерная транслокация NF-κB p65, экспрессия TLR4 и NF-κB p65 (P<0.01), при этом уровень IL-10 и IL-4 снижался (P<0.01), уменьшались уровень двойноположительной экспрессии Iba-1+/Arg1+ и экспрессия Arg1 (P<0.01). По сравнению с группой OGD/R группа APS (0.4 г/л) демонстрировала снижение активации клеток, значительное снижение уровней NO, TNF-α, IL-6 (P<0.01), снижение двойноположительной экспрессии Iba-1+/iNOS+, и относительной экспрессии белков Iba-1, iNOS (P<0.01), снижение ядерной транслокации NF-κB p65, экспрессии TLR4 и NF-κB p65 (P<0.01), при значительном повышении уровней IL-10 и IL-4 (P<0.01), а также уровня двойноположительной экспрессии Iba-1+/Arg1+ и экспрессии Arg1 (P<0.01). В модели нейровоспаления, индуцированной LPS, по сравнению с контролем наблюдалось увеличение активации клеток, уровней NO, TNF-α, IL-6, двойноположительной экспрессии Iba-1+/iNOS+, ядерной транслокации NF-κB p65, экспрессии белков Iba-1, iNOS, TLR4, NF-κB p65 (P<0.01), в то время как уровни IL-10, IL-4, двойноположительной экспрессии Iba-1+/Arg1+ и экспрессия Arg1 значительно снижались (P<0.01); по сравнению с группой LPS группа APS показала снижение активации клеток, уровней NO, TNF-α, IL-6, двойноположительной экспрессии Iba-1+/iNOS+, ядерной транслокации NF-κB p65, экспрессии Iba-1, iNOS, TLR4, NF-κB p65 (P<0.01), при значительном повышении уровней IL-10, IL-4, двойноположительной экспрессии Iba-1+/Arg1+ и экспрессии Arg1 (P<0.01). Заключение: APS, возможно, уменьшает активацию микроглии и продвигает их поляризацию в М2-тип, подавляя активацию сигнального пути TLR4/NF-κB, что снижает нейровоспаление, вызванное OGD/R.

полисахариды астрагала (APS); модель оксигенно-глюкозного дефицита/реперфузии; клетки микроглии BV2; липополисахарид (LPS); Toll-подобный рецептор 4 (TLR4)/ядерный фактор транскрипции-κB (NF-κB)