Цель: изучить влияние полисахарида астрагала (APS) на регуляцию сигнального пути толл-подобного рецептора 4 (TLR4)/ядерного фактора транскрипции-κB (NF-κB) на поляризацию микроглии BV2 в модели дефицита кислорода и глюкозы/реоксигенации (OGD/R). Метод: создана модель повреждения клеток BV2 с помощью OGD/R, разделённая на контрольную группу, группу OGD/R и группу APS (0,4 г·л^-1 APS); индуцирована нейровоспалительная травма липополисахаридом (LPS) с вмешательством APS, разделено на контроль, группу LPS (1 мг·л^-1 LPS) и группу APS (0,4 г·л^-1 APS + 1 мг·л^-1 LPS). Жизнеспособность клеток оценивали с помощью теста ССК-8; форму клеток наблюдали под инвертированным микроскопом; содержание оксида азота (NO) в супернатанте определяли методом Грисса; уровень секреции факторов воспаления (ФНО-α, IL-6, IL-10, IL-4) измеряли с помощью метода ELISA; методом иммунофлуоресценции (IF) определяли двойноположительный индекс кальций-связывающего белка Iba-1/индуцируемой NO-синтетазы (Iba-1⁺/iNOS⁺) и Iba-1/аргиназы 1 (Iba-1⁺/Arg1⁺), а также проникновение NF-κB p65 в ядро; методом вестерн-блоттинга (Western blot) оценивали уровень белков Iba-1, iNOS, Arg1, TLR4, NF-κB p65. Результаты: в модели повреждения OGD/R по сравнению с контролем наблюдалась активация клеток BV2 с амёбоидными изменениями, значительное повышение уровней NO, TNF-α, IL-6 (P<0,01), увеличение двойноположительного выражения Iba-1⁺/iNOS⁺ и экспрессии белков Iba-1, iNOS (P<0,01), значительное повышение проникновения NF-κB p65 в ядро, а также экспрессии TLR4 и NF-κB p65 (P<0,01), снижение уровней IL-10 и IL-4 (P<0,01), а также уменьшение двойноположительного выражения Iba-1⁺/Arg1⁺ и экспрессии Arg1 (P<0,01). По сравнению с группой OGD/R, в группе APS (0,4 г·л^-1) отмечено снижение активации клеток, значительное уменьшение уровней NO, TNF-α, IL-6 (P<0,01), снижение двойноположительного выражения Iba-1⁺/iNOS⁺, а также экспрессии белков Iba-1, iNOS (P<0,01), снижение проникновения NF-κB p65 в ядро, и экспрессии TLR4, NF-κB p65 (P<0,01), значительное повышение уровней IL-10, IL-4 (P<0,01), а также увеличение двойноположительного выражения Iba-1⁺/Arg1⁺ и экспрессии Arg1 (P<0,01). В модели нейровоспаления, индуцированной LPS, в группе LPS по сравнению с контролем наблюдалось усиление активации клеток, повышение уровней NO, TNF-α, IL-6, двойноположительного выражения Iba-1⁺/iNOS⁺, проникновения NF-κB p65 в ядро, а также экспрессии белков Iba-1, iNOS, TLR4, NF-κB p65 (P<0,01), снижение уровней IL-10, IL-4, а также двойноположительного выражения Iba-1⁺/Arg1⁺ и экспрессии Arg1 (P<0,01). По сравнению с группой LPS, в группе APS снижена активация клеток, уровни NO, TNF-α, IL-6, двойноположительного выражения Iba-1⁺/iNOS⁺, проникновение NF-κB p65 в ядро, экспрессия белков Iba-1, iNOS, TLR4, NF-κB p65 (P<0,01), уровни IL-10, IL-4, а также двойноположительное выражение Iba-1⁺/Arg1⁺ и экспрессия Arg1 значительно увеличены (P<0,01). Заключение: APS может снижать активацию микроглии и способствовать её поляризации в М2 тип за счёт ингибирования активации сигнального пути TLR4/NF-κB, уменьшая нейровоспалительный ответ после OGD/R.

Полисахарид астрагала (APS); модель дефицита кислорода/реоксигенации; микроглия BV2; липополисахарид (LPS); сигнальный путь толл-подобного рецептора 4 (TLR4)/ядерного фактора NF-κB