Цель исследования заключается в изучении роли капсул питательных почек и мозга в регуляции пути miR-15b/Wnt и стимуляции дифференцировки и зрелости нейроглиальных клеток OLN-93 с изучением эффектов и молекулярного механизма. Методы: Клетки OLN-93 были разделены на две группы - образцы и контроль (NC), группу BMSC-экзос и группу BSYS-BMSC-экзос, группу BSYS-BMSC+LV-ингибитор миР-15b-5р-экзос и группу BSYS-BMSC+LV-NC-экзос. Экзосы были мечены белком DiR, а затем взаимодействие с клетками OLN-93 оценивалось; с использованием теста CCK-8 была определена эффективная доза капсул питательных почек и мозга на клетки OLN-93. Культуры BMSC были инфицированны вирусными векторами для стабильной подавления miR-15b-5p их экспрессии, и их эксозы были собраны. Использовался реальный времени ПЦР для мониторинга экспрессии miR-15b-5p и проверки эффективности инфицирования вирусным вектором. Использовался иммунофлуоресцентный анализ (ICC) и иммуноблот для оценки эскразии из БТА в клетках OLN-93, а также использовался иммуноблот для изучения экспрессии Wnt3a в OLN-93. Реальное время ПЦР и иммуноблот использовались для определения уровней экспрессии в пути в сахара Wnt/β-катенина и для фермента гликогена-синтаза-киназа-3 β (GSK-3β), β-катенина и TCF4/TCF7L2 в клетках OLN-93. Результаты: Окрашенные белком DiR экзосы показали высокую способность к внутриклеточному поглощению клетками OLN-93. Результаты теста CCK-8 показали, что концентрация 20 мг/мл капсул питательных почек и мозга оказала наилучшее увеличение активности клеток OLN-93 (

关键词

Множественный склероз; капсулы питательных почек и мозга; экзозы костного мозга; нейроглиальные клетки OLN-93; микроРНК (микроРНК); путь miR-15b/Wnt