Целью исследования было изучение влияния капсул Tougu Xiaotong (TGBX) на регуляцию панафтоза в хондроцитах с целью замедления дегенерации хондроцитов и улучшения симптомов остеоартрита коленного сустава (KOA). Методы: В in vivo эксперименте 50 самцов мышей C57BL/6 были случайным образом разделены на 5 групп по 10 особей: ложная операция, модель, низкая и высокая дозы TGBX, группа диклофенака натрия. За исключением ложной операции, у остальных групп по модифицированному методу Hulth была создана модель KOA. После успешного моделирования группы TGBX получали растворы перорально в дозах 7,2 и 14,4 г/кг, группа диклофенака — 0,05 г/кг, один раз в день в течение 6 недель. Модель оценивали по индексу тяжести артроза суставов Lequesne MG и функциональной оценке колена; проводили микрокомпьютерную томографию (micro-CT) коленных суставов; исследовали морфологию хрящевой ткани с помощью гематоксилин-эозина (HE) и сафранина-быстрого зеленого; электронная микроскопия (TEM) использовалась для изучения ультраструктуры панафтоза хондроцитов; мультицветная иммунофлуоресценция для локализации белков cleaved Caspase-3, RIPK3 и N-концевого домена GSDMD (GSDMD-N) в хрящевой ткани; вестерн-блоттинг для выявления экспрессии белков. In vitro методом использовали 4-недельных крыс SD, получали культуру хондроцитов с применением механического и 0,2% коллагеназы. Второе поколение хондроцитов разделяли на контроль, модель (предварительная обработка LPS 10 мг/л 24 ч + Nigericin 1 мкмоль/л 4 ч), TGBX группа (аналогично плюс интерактивное лечение капсулой TGBX 100 г/л 24 ч). Под микроскопией изучали уровни активных форм кислорода (ROS), апоптоза, некротического апоптоза и панафтоза; TEM — ультраструктуру; ELISA — уровни IL-1β и IL-18 в супернатанте; западный блоттинг — белки, связанные с апоптозом и панафтозом. Результаты: По сравнению с группой ложной операции в модели наблюдались повышенные оценки Lequesne MG, сужение суставной щели, образование остеофитов, повреждение хряща, выраженное апоптотическое, некротическое и панафтозное повреждение; повышенная экспрессия cleaved Caspase-3, RIPK3, GSDMD-N, повышение ROS, выраженное свечение в окраске AO/EB и YO-PRO-1/PI; повышенные уровни IL-1β и IL-18; повышенная экспрессия связанных с панафтозом белков. По сравнению с моделью TGBX-группы показали значительное улучшение параметров, снижение оценки Lequesne MG, расширение суставной щели, уменьшение остеофитов, снижение повреждения хряща и панафтоза, улучшение митохондрий и ЭПР, снижение ROS и воспалительных маркеров, пониженная белковая экспрессия. Выводы: Капсулы TGBX замедляют дегенерацию хондроцитов и улучшают симптомы KOA, снижая окислительный стресс и экспрессию панафтозных белков GSDMD-N, cleaved Caspase-3 и RIPK3.

Капсулы Tougu Xiaotong; остеоартрит коленного сустава; хондроциты; панафтоз