Роль и механизм препарата Цяньцзиньпянь в регуляции сигнального пути Keap1/Nrf2 для снижения повреждений от окислительного стресса при варикоцеле

DONG Liang ,  

YANG Fang ,  

ZHANG Jingyi ,  

TANG Xinyi ,  

LI Yulin ,  

YU Xujun ,  

CHANG Degui ,  

摘要

Целью исследования было изучение механизма, с помощью которого препарат Цяньцзиньпянь улучшает спермопродукцию при варикоцеле (VC) через путь сигнальной передачи Keap1/ядерного фактора E2-связанных с факторами 2 (Nrf2), опосредующий окислительный стресс. Методы: 10 крыс SD были случайным образом разделены на контрольную и модельную группы, стабильность модели была подтверждена патоморфологическими исследованиями. 36 крыс SD были случайно разделены на шесть групп: контрольная, модельная, низкая доза препарата Цяньцзиньпянь (0,23 г/кг), средняя доза (0,46 г/кг), высокая доза (0,92 г/кг) и группа Майчжилин (61,7 мг/кг), по 6 крыс в каждой. Модель экспериментального варикоцеле левой стороны (ELV) у крыс создавали с помощью частичной перевязки левой почечной вены (моделируя синдром человеческого орехоколоса), дозы вводили перорально ежедневно в течение 28 дней. Вспомогательной культивировали клетки яичек крысы in vitro в камере Transwell, применяли лекарственную сыворотку с препаратом Цяньцзиньпянь (2,3, 4,6, 9,2 г/кг) для вмешательства. Под микроскопом наблюдали морфологию левой почки, микрометром измеряли диаметр левой яичковой вены (LSV); регистрировали еженедельный вес крыс, взвешивали придаток и яички; окраской гематоксилин-эозином (HE) наблюдали патологические изменения ткани яичек; уровни тестостерона и активных форм кислорода (ROS) в тканях яичка определяли методом иммуноферментного анализа (ELISA); содержание ROS определяли с помощью проточной цитометрии; иммуногистохимически анализировали экспрессию Keap1, Nrf2, 3β-гидроксистероиддегидрогеназы (3β-Hsd), связывающего белка Gata-4, рецептора тирозинкиназы онкогена (C-kit); ультраструктуру ткани изучали методом просвечивающей электронной микроскопии (TEM); апоптоз клеток выявляли методом мечения терминалов in situ (TUNEL); экспрессию Keap1, Nrf2, глутатион-S-трансферазы α2 (Gsta2), μ1 (Gstm1), гемоксигеназы-1 (HO-1), хиноноксидоредуктазы 1 (Nqo1), тиоредокси редуктазы 1 (Txnrd1) определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга. Результаты: по сравнению с контрольной группой в модельной значимо увеличилось содержание ROS и процент апоптотических клеток (P<0,01), концентрация тестостерона (Т) выраженно уменьшилась (P<0,01), уровни мРНК и белка Keap1 значительно повысились (P<0,01), а экспрессия Nrf2, Gsta2, Gstm1, HO-1, Nqo1 и Txnrd1 заметно снизилась (P<0,05). По сравнению с модельной группой в группах с разными дозами Цяньцзиньпянь содержание ROS и процент апоптотических клеток значительно уменьшились (P<0,05), уровни мРНК и белка Keap1 значительно снизились (P<0,05), а экспрессия Nrf2, Gsta2, Gstm1, HO-1, Nqo1 и Txnrd1 значительно выросла (P<0,05). Вывод: механизм улучшения спермопродукции при варикоцеле препаратом Цяньцзиньпянь связан с регуляцией пути Keap1/Nrf2 и снижением повреждений, вызванных окислительным стрессом.

关键词

Варикоцеле; традиционная китайская медицина; повреждения от окислительного стресса; белок, связанный с Kelch-подобным эпоксидным хлорпропаном 1 (Keap1)/ядерный фактор E2-связанных с фактором 2 (Nrf2) сигнальный путь; модель культивирования in vitro

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website